测定血清中的某些酶,如CK,离体(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巯基(一SH)被氧化造成的。只有通过适当的还原作用才能重新开始。如CK—NAC检测试剂盒即含有CK活化剂,名为N一乙酰半胱氨酸。实验研究证明,NAC对血清中已失活的CK活化过程约需180 S。这就是CK测定为什么要延迟时间较长的理论依据。在AST,ALT采用IFCC推荐方法测定时需要磷酸吡哆醛预活化。需要强调:含有活化剂的生化试剂,其测定酶活性的结果要高些。标准物质在方法确认中的主要作用是评估方法的正确度(偏差)及其测量不确定性。EDTA.2K抗凝(10% 无菌)
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HOAc与NaOAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。EDTA.2K抗凝(10% 无菌)固体试剂一般装在带胶木塞的广口瓶中,液体试剂则盛在细口瓶中。
检测试剂盒标本保存方法:标本管中增加物质的影响。抗凝剂、酶抑制剂及快速分别血清的分别胶等均对测定有必定烦扰作用。标本溶血。由于各种人为原因引起的标本溶血,均可因红细胞破坏溶解时释放出很多具有过氧化物酶活性的血红蛋白,在以辣根过氧化物酶为符号的测定中,会导致非特异性显色,检测试剂盒烦扰测定作用。为打败上述烦扰作用,标本搜集时有必要留意避免溶血。标本保存不妥。 在冰箱中保存过久的标本,血清中IgG可聚组成多聚体、AFP可构成二聚体,在间接法测定中会导致本底过深、乃至形成假阳性;标本放置时刻过长(如一日以上),有时抗原或抗体免疫活性削弱,亦可出现假阴性。为打败上述烦扰,测定的血清标本宜为新鲜搜集;如不能立即测定,5天内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质部分浓缩,分布不均,应充沛混合后再测定,但混匀时应轻柔,不行激烈振荡。
丁胺卡那霉素给药说明:(1)应监测血药浓度,尤其新生儿、老年和肾功能减退的患者,本品的有效治好浓度范围为15—25μg/ml,应避免高峰血药浓度持续在35μg/ml以上和谷浓度超过5μg/ml。(2)不能测定血药浓度时,应根据测得的肌酐除去率调整剂量。(3)给予开始饱和量(7.5mg/kg)后,有肾功能不全、前庭功能或听力减退的患者所用维持量酌减,即剂量不变,延长给药间期;或给药间期不变,每次剂量减少或停用本品。其维持量可按下式计算。①延长给药间期(小时),每次用量不变(7.5mg/kg),给药间期=患者血肌酐(mg/100ml)×9或②减少每次给药量,每12小时用药一次:每次剂量=患者肌酐除去率(ml/min)×7.5(mg/kg)/正常人肌酐除去率(ml/min)。由于阿米卡星在体内不代谢,主要经尿排出,因此肾功能减退的患者可能引起药物积聚达中毒浓度。液体试剂分散度大,吸收快。
怎样减少检测试剂盒误差?检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进。洗涤彻底,如若洗板不彻底,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。利福平溶液怎么配制:过滤灭菌后,小份分装(1-2ml每管)后,置于-20℃保存。JYBL-Ⅱ脱钙液
科研实验中试剂取用应注意事项:余下部分用胶头滴管滴加药液至所需刻度线。EDTA.2K抗凝(10% 无菌)
检测试剂盒实验注意事项有哪些?正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。在实验中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。EDTA.2K抗凝(10% 无菌)