杀灭曲线的建立:通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线),确定能够杀死未转染宿主细胞的较低浓度,从而筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。建立杀灭曲线至少选择5个浓度。1、按照20-25%的细胞密度将未转化的细胞铺在合适的培养板上,37℃,CO2过夜培养(需要更高密度,可增加接种量)。2、根据细胞类型,设定合适的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。3、第2天换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基,每个浓度做三个平行孔。4、接下来每3-4天更换新的含药物培养基。5、按照每2天进行活细胞计数,来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。通常7-10天内能够杀死绝大多数细胞的较低浓度为筛选用的工作浓度。检测试剂盒如为有菌操作,则主张冰冻保存。RNase A(100mg/ml)
潮霉素B溶液(Hygromycin B,50mg/ml)>20ml产品购须知:1、报价含普票含运费。2、可根据用户提供配方生产配置,详情咨询客服人员。3、大包装需求用户可根据订单生产。4、院校研究所支持货到付款。院校单位订购流程:咨询客服确定产品→告知客服人员收货开票信息→确立合同→等待收货→转账付款潮霉素B溶液(Hygromycin B,50mg/ml)>20ml为什么选择我们:1、3000余种实验室试剂,2000余种中草药标准品以及农药标准品现货供应,方便您的一站式采购。2、提供产品专业定*务,标准品可根据客户要求的规格包装。3、科研院校单位支持先发货后付款,解除老师报账上的困扰,免去您对产品质量的后顾之忧4、专业的客服人员解答,消除您心中对实验试剂选择的各种不确定。5、完善的售后服务,解除您的后顾之忧。6、杜绝暴利,节约您的每一分科研经费!RNase A(100mg/ml)在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大。
液体固体试剂正确取用试剂的方法过程:如需少量液体试剂则可用滴管取用,取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。为了达到准确的实验结果,取用试剂时应遵守以下规则,以保证试剂不受污染和不变质:试剂不能与手接触。要用洁净的药勺,量筒或滴管取用试剂,不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后,应将工具洗净(药勺要擦干)后,方可取用另一种试剂。试剂取用后一定要将瓶塞盖紧,不可放错瓶盖和滴管,绝不允许张冠李戴,用完后将瓶放回原处。已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。
试剂盒实验遇到复孔该怎么办。在设计复孔检查时,提出问题:是对同一个样品作两次稀释,再别离加到板上的两个孔,仍是只稀释一次,然后罗致两次别离加到两个孔?前者好像把稀释时的过错也考虑到了,但做出来的成果两个孔相关挺大的。在实验中设复孔,意图是为了削减本次实验的体系过错对实验数据带来的影响,所以应该用第二种,有条件的话复孔的数量能够添加,体系过错更小。选用后者。假定在实验室阶段,或许需求屡次稀释,然后将不同稀释次数的别离做复孔,以便检查稀释进程中带来的过错;假定同一次稀释的复孔一起的存在检测差异大,或许板的均一性存在必定问题(打扫操作因素)。假定不同稀释次数差异大,阐明稀释方法有问题。定量取用液体时,用量筒或移液管。
已知准确浓度的溶液,在容量分析中用作滴定剂,以滴定被测物质。如果试剂符合基准物质的要求 (组成与化学式相符、纯度高、稳定),可以直接配制标准溶液,即准确称出适量的基准物质,溶解后配制在一定体积的容量瓶内。可由下式计算应称取的基准物质的重量W:W=ΜV·基准物质的摩尔质量。式中Μ和V分别为所需配制的溶液的摩尔浓度和体积。利用上式可计算出标准溶液的浓度。如果试剂不符合基准物质的要求,则先配成近似于所需浓度的溶液,然后再用基准物质准确地测定其浓度,这个过程称为溶液的标定。丁胺卡那霉素给药说明:5%葡萄糖注射液或其他灭菌稀释液100—200ml。RNase A(100mg/ml)
固体试剂的取用:药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净。RNase A(100mg/ml)
配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着,是为了保持其原有的ph电势平衡不变,为了测量时会更加精确。这里面就是PH电极的保护液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己学会如何配置,使ph电极浸泡在保护液里,这样就能快速回复其活性,又能很好的测量了。配制ph计保护液——3mol/L的KCL溶液步骤: 1、计算:KCL摩尔质量74.5g/moL, 则KCL质量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 称量:用分析天平称量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解,并用玻璃棒搅拌; 4、 转移,洗涤:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口较细的。RNase A(100mg/ml)
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