RNA提取:主要试剂Trizol是一种新型总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞,压制细胞释放出的核酸酶。1.Trizol试剂含有苯酚,具有毒性和刺激性,注重操作。2.RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉,注重配带手套,样品尽可能盖严。3.细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低较后得率,因为一部分RNA会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质(结缔组织和骨除外)。在清洗和裂解细胞时较好在低温下操作,防止在操作过程中释放的内源RNase降解了RNA。4.酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构,可以加入Trizol试剂同时加入无RNase的玻璃珠并剧烈振荡,使细胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。RNA提取试剂:TRIpure试剂操作上的简单性允许同时处理多个样品,所有的操作可以在一小时内完成。广州正规RNA提取试剂产品介绍
RNA提取试剂注意事项:1、必须戴一次性手套操作,且尽量不要对着RNA样品说话,以防RNA酶污染。建议戴一次性口罩操作。2、TRIReagent含有毒物质苯酚,避免接触皮肤或吸入。为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。如皮肤接触TRIReagent,请立即用大量去垢剂和水冲洗,如仍有不适,请听取医生意见。3、TRIReagent抽提总RNA的同时,理论上也可抽提蛋白和DNA,但未经测试。4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。是基于异硫氰酸胍/苯酚法的一种即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂,在样品裂解或匀浆过程中取出水相,用异丙醇可沉淀回收RNA;中间层用乙醇沉淀可回收DNA;有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白。珠海正规RNA提取试剂产品介绍专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上,同时使污染物通过柱被有效地洗去。
新型土壤总RNA快速提取试剂盒:独特裂解剂/裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后RNA在高离序盐状态下选择性吸附于玻璃奶,然后将粗纯化的玻璃奶转移到离心柱,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将腐植酸、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,较后低盐的洗脱缓冲液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点:离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。兼容性强,适用于各种不同的土壤、粪便以及其他soil.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。快速,简捷,单个样品操作一般可在1小时内完成。多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9以上,可直接用于PCR,Northern-blot和各种酶切反应~
拭子RNA提取试剂的选择?操作简便性。操作简便性也是拭子RNA提取试剂选择的一个重要因素。操作过于复杂,不光费时费力,还容易导致样本间的交叉污染,也容易损失样本。特别是用于临床检测或样本量较多情况下的检测,操作复杂如果导致交叉污染会引起误诊,还会影响出检测报告的时间。因而,选用操作简便、流畅的提取试剂盒非常重要。就我们曾经用过的以上三种提取试剂盒来说,Q公司的拭子RNA提取试剂盒提取过程大约25min,从样本处理开始需要10个步骤;T公司拭子RNA提取试剂盒整个提取过程需要1个多小时,从样本开始处理10个步骤;B公司的Biog拭子RNA提取试剂盒提取过程大约20min,从样本开始处理7个步骤,B公司的拭子RNA提取试剂盒在操作简便性上具有一定优势,更适合于较多样本的检测。据了解,该产品已通过药监局备案,也更适合临床样本的检测。纯的RNA用RE缓冲液洗脱,不用酚提取或醇沉淀。
RNA提取试剂的选择:首先,要确定材料的可用性。尽管现有的RNA提取试剂都用压制RNase的成分,但提取的材料仍需谨慎处理。提取的材料的新鲜度是获取完整RNA的关键,但是由于种种原因无法立即从新鲜材料中提取RNA时,使用Takara公司的样品保护剂SampleProtectorforRNA/DNA可以免去使用液氮或超低温冰箱的不便,同时也可以有效解决组织、细胞样品的短时间保存及运输问题。此外,如果将不同时期收集的样品都预先存放于本试剂中,可以做到立即终止并固定RNA表达的时序变化,减少实验组间的误差买点无酶的吸头、离心管,找一个普通的试验台,穿好实验服戴好手套,保护好自己就好。宁波正规RNA提取试剂生产厂家
即用型RNA,可在绝大多数下游应用。广州正规RNA提取试剂产品介绍
RNA组成结构:RNA和DNA一样,也是由各种核苷酸通过3′,5′-磷酸二酯键连接构成的多核苷酸链,但与DNA有一系列差异。1.在化学组成方面,RNA含核糖而不含脱氧核糖。含尿嘧啶而不含胸腺密啶。例外的是,每个tNA分子含有一个胸腺嘧啶,这是在RNA链合成后由尿嘧啶甲基化生的,此外,前面已提到,少数DNA含有少量核糖,但这些个别的例外并不能以此否定两类核酸组成上的差异。2.RNA一级结构的概念虽与DNA相同.但其基本结构单位是核糖核苷酸而不是脱氧核糖核苷酸。此外,部分RNA5′端或3′端有特殊的核苷酸序列,而且RNA一级结构中没有DNA那样复杂的顺序组织。3.绝大多数RNA为单链分子,单链可自身折迭形成发夹(hairpin)样结构而有局部双螺旋结构的特征,这是各种RAN空间结构的共同特征。RNA局部双螺旋结构中碱基互补配对规律是A对U和G对C。由于RNA分子内部不能较全形成碱基配对,故其碱基克分子比A不等于U,G不等于C,不存在DNA碱基比例的Chargaff规律。广州正规RNA提取试剂产品介绍
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