膜片钳基本参数
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膜片钳企业商机

膜片钳技术是由诺贝尔奖获得者Neher和Sakmann于1976年发展起来的一种记录细胞膜离子通道电生理活动的技术。该技术的应用连接了细胞水平和分子水平的生理学研究,已成为现代细胞电生理学研究的常规方法。它广泛应用于生物学、生理学、病理学、药理学、神经科学、植物和微生物学,并取得了丰硕的研究成果。膜片钳技术点燃了细胞和分子水平生理学研究的**之火,并与基因克隆技术并驾齐驱,给生命科学研究带来了巨大的推动力。钙成像技术***用于实时监测神经元、心肌和各种细胞内钙离子的变化,从而检测神经元和心肌的活动。这些技术是人们观察神经和各种细胞活动的直接手段,现已发展成为生命科学研究的热点,也是国家自然科学基金鼓励申报的重要领域。膜片钳实验服务|离子通道|膜片钳CRO|因斯蔻浦。高通量全自动膜片钳系统

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不同的全自动膜片钳技术所采用的原理如PopulationPatchClamp技术∶同SealChip技术一样,完全摒齐了玻璃电极,而是采用PatchPlate平面电极芯片。该芯片含有多个小室,每个小室中含有很多1-2μm的封接孔。在记录时,每个小室中封接成功的细胞|数目较多,获得的记录是这些细胞通道电流的平均值。因此,不同小室其通道电流的一致性非常好,变异系数很小。美国Axon(MDS)公司采用这一技术研发出了全自动高通量的lonWorksQuattro系统,成为药物初期筛选的金标准滔博生物TOP-Bright专注基于多种离子通道靶点的化合物体外筛选,服务于全球药企的膜片钳公司,快速获得实验结果,专业团队,7*39小时随时人工在线咨询.美国高通量全自动膜片钳实验操作全细胞膜片钳记录是应用较早,也是普遍的钳位技术。

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膜片钳的应用范围:1.单离子通道(如钠、钾)的功能研究;2.心肌细胞离子通道研究(尤其与药物作用相关的);3.常规与病理的离子通道作用机制研究;4.单细胞的形态与功能关系的研究;5.心血管药理学的研究;6.脑片膜片钳(证实了脑组织在体外也能存活并保持很好的活性状态,能使对脑细胞的研究更接近生理状态下的情况,可检验不同脑区间的神经通路与功能链接);7.神经环路的研究(光遗传或化学遗传病毒载体表达的验证);8.神经突触可塑性的研究。

对药物作用机制的研究,在通道电流记录中,可分别于不同时间、不同部位(膜内或膜外)施加各种浓度的药物,研究它们对通道功能的可能影响,了解那些选择性作用于通道的药物影响人和动物生理功能的分子机理。这是目前膜片钳技术应用普遍的领域,既有对西药药物机制的探讨,也普遍用在重要药理的研究上。如开丽等报道细胞贴附式膜片钳单通道记录法观测到人参二醇组皂苷可控制正常和“缺血”诱导的大鼠大脑皮层神经元L-型钙通道的开放,从而减少钙内流,对缺血细胞可能有保护作用。陈龙等报道采用细胞贴附式单通道记录法发现乌头碱对培养的Wistar大鼠心室肌细胞L-型钙通道有阻滞作用。膜片钳80%的工夫在于刺备细胞。

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高阻封接技术还明显降低了电流记录的背景噪声,从而戏剧性地提高了时间、空间及电流分辨率,如时间分辨率可达10μs、空间分辨率可达1平方微米及电流分辨率可达10-12A。影响电流记录分辨率的背景噪声除了来自于膜片钳放大器本身外,主要还是信号源的热噪声。信号源如同一个简单的电阻,其热噪声为σn=4Kt△f/R式中σn为电流的均方差根,K为波尔兹曼常数,t为温度,△f为测量带宽,R为电阻值。可见,要得到低噪声的电流记录,信号源的内阻必需非常高。如在1kHz带宽,10%精度的条件下,记录1pA的电流,信号源内阻应为2GΩ以上。电压钳技术只能测量内阻通常达100kΩ~50MΩ的大细胞的电流,从而不能用常规的技术和制备达到所要求的分辨率。离子和离子通道是细胞兴奋的基础,亦即产生生物电信号的基础,生物电信号通常用电学或电子学方法进行测量。双分子层膜片钳离子电流

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钙成像技术被广泛应用于实时监测神经元、心肌以及多种细胞胞内钙离子的变化,从而检测神经元、心肌的活动情况。这些技术是人们观测神经以及多种细胞活动为直接的手段,现已发展为生命科学研究的热点,也是国家自然科学基金等鼓励申报的重要领域。光遗传学调控技术是近几年正在迅速发展的一项整合了光学、基因操作技术、电生理等多学科交叉的生物技术。NatureMethods杂志将此技术评为"Methodoftheyear2010"[19];美国麻省理工学院科技评述(MITTechnologyReview,2010)在其总结性文章"Theyearinbiomedicine"中指出:光遗传学调控技术现已经迅速成为生命科学,特别是神经和心脏研究领域中热门的研究方向之一。目前这一技术正在被全球几百家从事心脏学、神经科学和神经工程研究的实验室使用,帮助科学家们深入理解大脑的功能,进而为深刻认识神经、精神疾病、心血管疾病的发病机理并研发针对疾病干预和的新技术。滔博生物TOP-Bright专注基于多种离子通道靶点的化合物体外筛选,服务于全球药企的膜片钳公司,快速获得实验结果,专业团队,7*58小时随时人工在线咨询.高通量全自动膜片钳系统

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