CASA系统进行**分析应注意以下几点:
3.2**分析仪阈值的确定(1)精子灰度、对比度阈值:由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪,对亮度和对比度要求特别高,检测时应多次试用,寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。(2)碎片:测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰,测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9],这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分,如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等,可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内,应将**3000ɡ离心15分钟后,再涂片检查,确认无精后再出报告。 精子分析仪能分析与精子运动功能相关的各种参数。上海快速运动精子分析负相差
精子手工计数原理及操作方法
1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml 南京水生动物精子分析DSL所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训,严格按照使用指南进行操作。
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。
CASA系统虽然有诸多优点,但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点:3.1标本的采集与制作(1)采集前禁欲2�7天,禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。(2)容器要清洁。(3)特殊情况下,*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套,普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。(4)注意保温(20�37℃),并于30分钟内送检验科。(5)标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性,因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。(6)密切注意**液化的情况,确保液化时间准确,因**样本随放置时间的延长,精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间,然后进行分析。(7)检测精子活动力,标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的标本,通常会增加碰撞的频率,并可能由此出现错误的结果。在这种情况下,建议用同源精浆稀释标本。全自动精子分析仪在临床Z疗中展现了明显的优势。
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。CASA系统主要用于精子动力学的分析,可以评估精子的浓度、活力等参数。北京鱼精子分析DCL
HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,摆动性(WOB):实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。上海快速运动精子分析负相差
方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。上海快速运动精子分析负相差
在精子形态学检查中,通过CASA系统对精子形态学特征进行分析,有些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾...
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