精子检测是通过一系列检测方法来评估男性生育能力的指标之一。而检测方法的选择直接影响到检测的准确性和结果的可靠性。目前,常用的检测方法有手动计数法、显微镜计数法、电子显微镜计数法、精子运动轨迹分析法等。手动计数法是通过显微镜手动计算精液中精子数量的方法,该方法简单易行,但因操作者技能不同,容易出现误差。显微镜计数法是通过显微镜观察精液中精子数量的方法,该方法比手动计数法更加准确,但需要专业的技能和经验。电子显微镜计数法是通过电子显微镜观察精液中精子数量的方法,该方法非常准确,但需要昂贵的设备。精子运动轨迹分析法是通过计算机分析精子运动轨迹来判断精子活力和数量的方法,该方法不仅准确性,而且可以直观地显示精子的运动状态,但需要较为复杂的技术。除了以上常见的检测方法,还有一些新兴的检测方法,如流式细胞术、全自动分析系统等。这些检测方法虽然在检测精子数量、活力等方面具有一定优势,但由于技术上的限制和设备的昂贵,目前还没有得到广泛应用。在选择检测方法时,需要考虑检测的目的、检测的准确性和结果的可靠性等因素。同时,需要选择正规的医疗机构进行检测,避免因设备不足或技术不过关等因素导致检测结果出现误差。CASA系统可以给出多种精子运动状态的参数,这些参数能够帮助更有效地了解精子的运动特性。北京前向运动精子分析W.H.O 5
五、精子活动力检测[正常参考值]**后30-60分钟活动力为Ⅲ级以上的精子>0.80:**后120分钟内活动力为Ⅲ级以上的精子>0.60;**120分钟后0.25-0.60的精子仍能活动。[临床意义]活动不良或不活动的精子增多,是导致不育的重要原因之一。常见于精索静脉曲张、泌尿生殖系的非特异性***如大肠杆菌***,某些代谢药、抗疟药、雌***、氧化氮芥等,也可使精子活动力下降。六、精子计数[正常参考值](100-150)×109/L或一次排精总数为(4-6)×108。[临床意义]1.精子计数小于20×109/L或一次排精总数少于1×108为不正常,见于精索静脉曲张、铅金属等有害工业污染、大剂量放射线及某些药物影响。2.精液多次未查到精子为无精症,主要见于睾丸生精功能低下,先天性输精管、精囊缺陷或输精管阻塞。输精管结扎术2个月后精液中应无精子,否则说明手术失败。3.老年人从50岁开始精子数减少以至逐步消失。香港密度精子分析W.H.O 4精子分析系统较传统的分析法比较,具有速度快、量比性好、准确性高、为临床和科研提供客观的检测依据。
精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。
将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。
精液显微镜检查
精子计数:正常人精子计数为0.6×1012~1.5×0.012/L,相当于一次排出的精子总数为400×106~600×106。当精子计数值<20×106/ml或一次排精总数<100×106为精子减少,超过致孕极限而导致不育。精液直接涂片或离心沉淀后均未查到精子为无精症。见于先天性睾丸发育不全、畸形或后天睾丸损伤和萎缩(如睾丸结核、炎症、淋病、垂体或肾上腺功能异常的内分泌性疾病等)、输精管阻塞或是先天性输精管及精囊缺陷,是导致少精或无精的重要原因,也是导致不育的重要原因。检查有无精子也是检查输精管结扎术的效果观察。结扎六周后,连续检查无精子,说明手术成功,如果结扎两个月后,精液中仍有精子,说明手术不成功。 精子分析仪参数,平均路径速率(VAP):精子头沿其平均路径移动时的时均速率。
世界卫生组织(WHO)《人类精液及精子—宫颈粘液相互作用实验室检验手册》于1980年***出版,以满足临床与科研对人类精液标准化检测程序日益增长的需求。该手册是人类精液实验室检查和处理程序及方法的标准操作指南,旨在提高精液分析的质量和提高不同实验室结果的可比性。在过去40年里,该手册进行了4次修订与补充(1987年、1992年、1999年和2010年),内容涉及精液检查的标准化操作程序、精子功能、精浆生化、精液处理与冷冻以及质量保证等,已成为国际公认的标准,被世界各地临床和实验室***使用。中国卫生部已在2003年将其纳入人类辅助生殖技术规范。WHO《人类精液检查与处理实验室手册(第5版)》精液参考值的数据是来自全球3大洲8个国家的前瞻性、多中心临床研究的结果,通过循证医学研究获得的精液参数参考值具有里程碑式意义。自2010年出版以来成为WHO很受欢迎的出版物之一,即使在**近几年其下载量也在稳步增长。它是男科实验室及全球范围内开展精液分析操作的其他实验室、医院和研究机构使用的标准操作手册。该手册在国际大会、科学会议、以及WHO合作中心、专业学会和其他学术机构的培训项目中进行了***传播。截止到2021年,已被3000余篇同行评议论文和评论引用。电脑全自动精子采集分析仪是一款高科技医疗设备,它巧妙地融合了现代计算机技术和自动控制技术。北京全自动化精子分析W.H.O 5
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方法:使用两种已知浓度的质控乳胶珠溶液,1份浓度为(35±5)×106/ml,另1份浓度为(18.0±2.5)×106/ml,评价4种计数方法的准确性和精确性,并比较4种方法计数精液的结果。结果:计数乳胶珠时,CellVU计数池的结果**接近已知浓度,分别为(39.70±4.76)、(19.09±2.02)×106/ml,变异系数(CV)值分别为12.80%和10.58%;血细胞计数池和Makler计数池结果均高于已知浓度,前者为(44.84±4.86)×106/ml、(21.04±1.87)×106/ml,CV值分别为10.81%和8.89%,后者为(52.36±7.78)×106/ml、(24.54±3.67)×106/ml,CV值分别为14.86%和14.96%;CASA系统结果低于已知浓度,为(28.53±2.06)、(14.62±0.95)×106/ml,但CV值比较低,分别为7.22%和6.50%。计数精液时,CellVU计数池与CASA系统结果差异无***性(P=0.71),分别为(45.28±34.52)、(41.96±31.93)×106/ml,血细胞计数池和Makler计数池结果差异无***性(P=0.14),分别为(76.98±59.90)、(63.89±53.84)×106/ml,CellVU计数池、CASA系统与血细胞计数池、Makler计数池结果间差异***(P<0.05或P<0.01)。结论:计数精液时,CASA系统与CellVU计数结果差异无***性。各实验室可选择合适的手工或CASA计数方法。北京前向运动精子分析W.H.O 5
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