男科实验室中通常所指的质量包含三个方面:实验室内部质量、医生处置的质量以及结果的质量[3]。1.实验室内部质量与**分析有关的实验室内部质量主要是工作人员的素质和所采用仪器的质量。工作人员应经过特殊的培训仪器必须处于正常状态、确保准确的结果操作应符合规程[4]。CASA系统本身的质量难于评定。硬件如显微镜、影像摄影机和计算机经检查便可确定其可靠性。但软件并非如此软件中存在不确定的因素算法是软件中**重要的部分通常制造者保守这些秘密;因此有关软件的数学上、信息性的、统计学的或生物测量方面的检查实验室难于进行。精子分析仪参数,精子头侧摆幅度(ALH):精子头关于其平均路径的侧向位移幅度。广州牛精子分析BCF
采集精液前5~7天内必须停止性生活,并且不得有**、梦遗等情况,还应禁烟戒酒,忌服对生精功能有影响的药物等。采取精液时间以晨起为佳,采精前用温水将双手、**,尤其是**洗净。可采用**法或电动按摩**法引起排精。精液的排出具有一定顺序,开头部分来自前列腺、附睾及壶腹,伴有大量精子,***部分来自精囊,故应收集整份精液,不要遗漏任何部分,尤其是开头部分。正因为易丢失精液的***部分,故不能用体外**法收集精液。盛精液的容器应干净、无菌、干燥,采精前容器的温度应与室温相同;瓶子不应过大,但瓶口不应过小,以免将精液射出瓶外;还应贴上标签,记录姓名及取精时间。在冷天应将精液标本保温,放置在贴身内衣袋中,不可倾斜或倒置,尽可能在1小时内送到实验室。美国狗精子分析精确温度控制男性精液检测主要依赖计算机辅助精子分析仪(computer assistant semen analyses,CASA)。
CASA系统进行**分析应注意以下几点:
3.2**分析仪阈值的确定(1)精子灰度、对比度阈值:由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪,对亮度和对比度要求特别高,检测时应多次试用,寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。(2)碎片:测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰,测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9],这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分,如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等,可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内,应将**3000ɡ离心15分钟后,再涂片检查,确认无精后再出报告。
人类精子冷冻保存和储存:增加了冷冻样本的安全性、精液冷冻保存方案、快速液氮熏蒸冷冻、冷冻精液的解冻、玻璃化冷冻等内容,更具可操作性。本手册对人类精子的冷冻保存提出了具体建议:将样本分管分罐分开储存;对使用的材料和留存标本建立定期核验程序;所有储罐都应有液位监控报警系统,以监测温度和液氮液位,传感器应连接警报器,可通过实验室人员的终端进行提醒。新证据表明,玻璃化冷冻是冷冻保存精液的一种有价值的方法。该方法的原理是将小体积样本与无污染液氮直接接触并快速冷冻,可以防止冰晶的形成,并减少精子的渗透性损伤。在麦管玻璃化冷冻(无菌玻璃化冷冻)中,也可以使用封闭系统,不需要无菌的液氮。全自动精子分析仪严格按照世界卫生组织(WHO)和KRUGER标准,并通过ISO9001认证。
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,直线性(LIN):曲线轨迹的直线性。美国狗精子分析精确温度控制
Hamilton Thorne精子分析仪具有高度的可靠性和稳定性,能够长时间稳定运行,保证数据的准确性和可重复性。广州牛精子分析BCF
CASA可将每个精子的活力按以下分级:(1)前向运动型(PR):精子运动活跃、线性运动或者在较大的范围内运动。(2)非前向运动型(NP):所有其他非前向运动的形式,如精子在较小的范围内运动,精子头部轻微移位或只观察到尾部摆动。(3)完全不动型(IM):精子完全不动。CASA系统检测的这些参数有一套标准的术语。(1)VCL=曲线速度(mm/s)。精子头沿其实际的曲线,即在显微镜下见到的二维方式运动轨迹的平均速度。检测细胞活力。(2)VSL=直线速度(mm/s)。根据精子头在开始检测时的位置与***所处位置之间的直线运动的时间平均速度。(3)VAP=平均路径速度(mm/s)。精子头沿其空间平均轨迹移动的时间平均速度。(4)ALH=精子头侧摆幅度(mm)。精子头沿其空间平均轨迹侧摆的幅度。以侧摆的最大值或平均数值表示。(5)LIN=直线性。曲线轨迹的直线性。即VSL/VCL。(6)WOB=摆动性。精子头沿其实际轨迹的空间平均路径摆动的尺度。即VAP/VCL。(7)STR=前向性。空间平均路径的直线性。即VSL/VAP。(8)BCF=鞭打频率(Hz)。精子曲线轨迹越过其平均路径轨迹的时间平均速率。(9)MAD=平均移动角度(度)。精子头沿其曲线轨迹瞬间转折角度的时间平均***值。广州牛精子分析BCF
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