在精子形态学检查中,通过CASA系统对精子形态学特征进行分析,有些特征(细胞大小、形状、光学密度、尾的存在以及其它)可由操作者选择,这样就会引起同一标本在不同实验室或不同分析者测得的结果一致性较差[10]。4结论和展望计算机辅助**分析具有较好的可靠性、重复性和稳定性,与传统的光学显微镜目测估计相比,更具有快速方便、对比性强、便于交流等明显优点[11],常规**检查无法测定精子微细运动特点,显示CASA在男性不育症诊断筛选中的优越性。王益鑫亦发现,部分手工**检查正常的不育患者,进行**全自动分析及生化检测,均发现明显异常[12]。因此,CASA系统在男性生殖能力检验方面具有重要的实际应用意义。CASA系统用量少,检测速度快,能够显著提高实验室的工作效率。香港狗精子分析LIN
精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。
将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。 北京CASA精子分析LIN精子分析仪因其高效、J准的特点,已经在众多医疗机构中广泛应用,深受患者信赖。
精子分析仪工作原理
以灰度识别CASA为例,采用高分辨率的摄影技术与显微镜结合,**标本液化后吸入计数,通过显微镜放大后,用图像采集系统获取精子动、静态图像后输入计算机。根据设定的精子大小和灰度、精子运动移位及运动参数,对采集图像进行精子密度、活动力、活动率、运动特征等几十项检验项目动态分析,由计算机处理后,打印出“**分析检查报告以及精子动态特征分布图”。一次能对1000个精子进行动态检测分析,2-3分钟即可完成检测 [1]。
优点:
操作简便,用量少,检测速度快,重复性优于人工检测,并且能够快速、准确的测定精子密度、活力、精子分级等,还可提供精子运动状态的多种参数等。
缺点:
影响分析结果的因素较多,除**本身性质所含的固有误差外,不同的精子计数池的相对准确性和精确性可产生明显不一致的效果。
CASA系统进行**分析应注意以下几点:
3.2**分析仪阈值的确定(1)精子灰度、对比度阈值:由于分析仪是根据灰度的高低来判断精子的真伪,对亮度和对比度要求特别高,检测时应多次试用,寻找能准确识别精子的比较好灰度阈值[8]。(2)碎片:测定精子浓度准确性受**中细胞成份和非精子的颗粒物质的干扰,测定活动精子的百分率也受精子中非精子物质的影响[9],这些也是需要注意的。对于系统误认为精子的非精子成分,如精原细胞、白细胞和非白细胞颗粒等,可人为准确记数后在可删除杂质一栏将其舍去。3.3出现1次异常结果应间隔复查反复检查2�3次方能得出比较正确的结果。3.4对于无精子的患者应仔细进行视野检查注意不要将杂质误认为精子计数在内,应将**3000ɡ离心15分钟后,再涂片检查,确认无精后再出报告。 所有操作人员都应接受规范的CASA分析仪使用培训,严格按照使用指南进行操作。
通过比较进行质量评估
1.室内比较是采用同一个标本在同一参数下经CASA多次测定后应用适当的统计学方法对测得数值进行比较。在男科实验室中对CASA系统的质量控制通常使用影像磁带或完全相同的冻存**标本进行日间比较。当室内比较作为结果质量的一种评估时计算机中数值的在线获得是极具优势的。
2.室间比较要求标本向其他几个实验室运送文献中的一些报道阐述了该方面的经验但是运动精子是不能在不受限制的条件下运输的将其置于液氮中运送需进一步考虑更多的因素(解冻技术、标本的处理等)这些因素会影响活动力参数;到目前为止室间比较的研究还未见满意报道;Jorgensen等进行了研究尝试克服实验室间运送解冻标本的困难其研究方式是:邀请四个实验室的实验人员携带各自的仪器到同一个地点以各自通常采用的实验方法进行精子评估但未见明确的结论。3.对于精子活力测定CASA系统的测定与直观评估的比较有文献进行了报道但结果并不相同。认为直观评估揭示标准数值且其差异是由CASA系统的错误引起的该观点是不正确的;无论从理论上还是实践中CASA数值比直观评估所获得的数值更接近于真值;对直线前进的精子比例而言这一点是非常正确的。 HAMILTON THORNE精子分析仪可分析参数,摆动性(WOB):实际的曲线路径关于平均路径的摆动值。香港Hamilton Thorne精子分析VSL
选择合适的CASA检测原理和设备,确保帧率要求,避免因设备问题影响检测结果。香港狗精子分析LIN
CASA系统虽然有诸多优点,但是很多因素都会影响到CASA仪器的使用及准确性。CASA系统进行**分析应注意以下几点:3.1标本的采集与制作(1)采集前禁欲2�7天,禁欲时间过长、过短对**质量都有一定影响。(2)容器要清洁。(3)特殊情况下,*可使用专门为采集**设计的无毒性避孕套,普通的乳胶避孕套因含有损害精子活力的物质不可使用。(4)注意保温(20�37℃),并于30分钟内送检验科。(5)标本置于37℃水浴.精子运动参数具有温度敏感性,因此要求计数池应于分析仪恒温板上预温。(6)密切注意**液化的情况,确保液化时间准确,因**样本随放置时间的延长,精子活动力及活动率有减少的趋势。标本液化后取混匀样本**1滴滴在样品池中间,然后进行分析。(7)检测精子活动力,标本密度应控制在2×106/ml到50×106/ml之间。具有高密度(如高于50×106/ml)精子的标本,通常会增加碰撞的频率,并可能由此出现错误的结果。在这种情况下,建议用同源精浆稀释标本。香港狗精子分析LIN
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