**分析是判断男性生育能力的**基本和**重要的常规检测方法。目前我国医学实验室普遍使用人工方法进行分析,结果缺少准确性、客观性和可比性。虽然WHO于近几年多次修改并推荐**常规分析的标准方法,但仍不能充分克服人为主观因素的影响。特别是对精子的活率和活力的分级主要依赖检验者的经验和主观判断,不同的技术人员分析的结果有时相差甚远,对精子运动能力的判断缺少严格的量化指标。因此应用一种统一、标准和快速的检测方法替代人工方法十分必要。计算机计算机辅助**分析系统在**质量检测中的应用49中国卫生信息管理杂志第8卷第6期辅助精子分析(Computer-aidedSpermAnalysis,CASA)系统逐步取代了人工操作,在男性不育症临床诊治及科研中CASA技术弥补了人工方法进行**分析的不足。精子分析,平均角位移(MAD):精子头沿其曲线轨迹瞬时转折角度的时均J对值。上海人精子分析W.H.O 4
检查具备条件
受检者,经历一段经常排精过程后,禁房事5-7天(上次排精到取标本间隔时间至少不得少于100小时); [1]备大口有盖清洁干燥容器一个,以**方式获取精液,一次全部射入容器,盖上盖,记录标本离体时间; 贴身保温,30分钟内送到化验室,并向检验员提供标本取出时间。 精液常规观察:精液总容量(毫升),精子活动情况,精子密度(个/毫升),精液液化时间(标本取出到精液液化的时间),不动精子(个/高倍视野)等。见不动精子,须染色方可区分:不活动的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必须离心后检验,仍然找不到精子;方可报告无精。经三次取样化验,结果仍然找不到精子方可确认无精子症。 南京Hamilton Thorne精子分析频闪光源Hamilton Thorne精子分析仪的操作简单易懂,用户无需具备专业知识也能够轻松上手使用。
精子手工计数原理及操作方法
1.原理:将精液用适当的稀释液作一定量稀释后,混匀注入计数池内计数,再算出每毫升精液中精子数。2.方法(按照***版第四版《全国临床检验操作规程》)1).于小试管内加精子稀释液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀释液内混匀。2).充分摇匀后,滴入改良Neubauer计数板的计数池内,静置1~2分钟,待精子下沉后,以精子头部作为基准进行计数。
3.计算1).如每个**中方格内精子少于10个,应计数所有25个中方格内的精子数。2).如每个**中方格内精子在10~40个,应计10个中方格内的精子数。3).如每个**中方格内精子多于40个,应计数5个中方格内的精子数。公式:精子数=计数结果/计数中方格×25×1/计数池高度×20×103/ml=计数结果/计数中方格×1/计数池高度×5×103/ml
精子计数是在显微镜下计算一次排出的精液中精子的数量将精子计数值乘以精液量就可得出一次**的量。
精液液化后将样本按一定比例稀释和固定后,滴于血细胞计数板上,在显微镜下计数红细胞计数区内的所有精子数并换算为每m1内所含精子数。此外还可用电子细胞计数仪经调整阈值设置后计数精子数量。
将已经液化的精液标本均匀混合,用白细胞计数吸管吸精液至0.5刻度,再吸稀释液至11刻度,振荡三分钟,然后置于血球计数板内,计数二大格(每格面积1平方毫米)之精子数,在尾数后加5个“0”即得每毫升精液内精子数。例如计数为1280个,则每毫升精子应为128,000,000。精液稀释液之配制:重碳酸钠5克、福尔马林1毫升、蒸馏水加至100毫升。稀释液内重碳酸钠有消化粘液的作用,福尔马林有使精子制动的作用。如精液之稠度过高而不易吸取时,可以精液1毫升混匀于稀释液19毫升内,稀释后进行计数。如精子的数目极少,亦可改为稀释10倍计数。每次排精75%的精子是从附睾尾部所贮存的,还有25%是由输精管道的其他部分来的,因此单凭一次排精的精子计数来衡量睾丸生精机能是不***的。只有在排精后间隔4-5天以后多次精液检查,才能比较正确地从这些精子计数来反映睾丸的生精机能。 Hamilton Thorne精子分析仪采用先进的光学成像,能够实时分析精子的动力学参数,提供有效的精子质量评估。
精子分析仪工作原理
以灰度识别CASA为例,采用高分辨率的摄影技术与显微镜结合,**标本液化后吸入计数,通过显微镜放大后,用图像采集系统获取精子动、静态图像后输入计算机。根据设定的精子大小和灰度、精子运动移位及运动参数,对采集图像进行精子密度、活动力、活动率、运动特征等几十项检验项目动态分析,由计算机处理后,打印出“**分析检查报告以及精子动态特征分布图”。一次能对1000个精子进行动态检测分析,2-3分钟即可完成检测 [1]。
优点:
操作简便,用量少,检测速度快,重复性优于人工检测,并且能够快速、准确的测定精子密度、活力、精子分级等,还可提供精子运动状态的多种参数等。
缺点:
影响分析结果的因素较多,除**本身性质所含的固有误差外,不同的精子计数池的相对准确性和精确性可产生明显不一致的效果。 Hamilton Thorne精子分析仪具有良好的数据管理和报告生成功能,能够方便用户查阅和分享分析结果。上海濒危物种精子分析VSL
精子分析仪与人工方法相比具有客观,高效,高精度的优点。上海人精子分析W.H.O 4
通过结果的生物学意义对结果质量进行评估当所有具生物学意义的参数在测试中表现出较小的可变性时则方法学可变性亦较低方法学可变性低则结果质量就高。CASA系统获得的数值与直观评估获得的数值进行分析和比较在精子数量和综合运动性上具有较好的相关性而·131·中国优生与遗传杂志2002第10卷第6期DOI:10.13404/j.cnki.cjbhh.2002.06.091在前向运动精子百分率上的相关性较低]。Holt等报道了在常规实验条件下采用五种不同的CASA系统对**参数值进行比较,其结果为:采用同一个测定池由不同的操作者测定**参数;变异系数(CV)是29%活动精子比率的CV为24%平均路径速度(VAP)的CV为43∙85%。作者们指出该分析结果不应看作是不同CASA系统间的工作情况的比较实际上它揭示了操作者的错误是差异的主要来源。目前有待于寻找进一步的标准来评估CASA变量的结果质量。精子***的生物学功能是使卵细胞授精因此用夫妇中的授精结果来考察精子运动性是合理的只有在该基础上能够确定活动性参数的重要性。辅助生殖技术(授精IVF)的发展使检测精子质量与各参数间的关系的比较成为可能;同样可以验证CASA测定结果与精子真实质量间的相关性有利于CASA结果质量的提高。上海人精子分析W.H.O 4
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