秋水仙素为什么会使有丝分裂的细胞停滞于中期
如果用秋水仙素处理有丝分裂的细胞,纺锤体会迅速消失,细胞停滞在有丝分裂中期,染色体无法分离成两组。用秋水仙碱进行诱导,从而将细胞阻断在细胞分裂中期,也是诱导细胞周期同步化的重要方法之一。真核细胞周期可分为4个时期,分别是G1期、S期、G2期和M期。在细胞周期调控中主要有3个控制点,***个控制点在G1期,决定细胞能否进入S期;第二个控制点在G2期,决定细胞能否进入有丝分裂期;第三个控制点在M期,决定细胞是否已经准备好将复制好的染色体拉向两极。CDK(周期蛋白依赖性蛋白激酶)对细胞周期运行起着**性调控作用,CDK与不同时期的周期蛋白结合会在特定周期起调节作用。cyclinA、cyclinB是在M期起调节功能的两种主要周期蛋白。细胞周期运转到分裂中期后,在后期促进复合物(APC)的作用下,M期cyclinA和cyclinB通过泛素化途径迅速降解,Cdkl活性丧失,细胞周期便从M期中期向后期转化。APC活性变化是细胞周期由分裂中期向后期转换的关键因素,其活性受到多种因素的综合调节,纺锤体组装检查点是其重要的调控因素。纺锤体组装不完全,或所有动粒不能被动粒微管全部捕捉,则APC不能被***。 纺锤体微管的动态变化是细胞分裂周期的重要标志。哺乳动物纺锤体Hoechst染料
无需染色纺锤体观察技术能够实时监测冷冻过程中纺锤体的形态变化,从而准确评估冷冻保存的效果。通过对比冷冻前后纺锤体的形态和稳定性,研究者可以优化冷冻保护剂的配方和浓度,以及改进冷冻程序,减少冷冻损伤,提高解冻后卵母细胞的存活率和发育潜能。解冻后的卵母细胞在无需染色的情况下,可以直接通过Polscope系统进行纺锤体观察。这一技术能够迅速评估解冻后卵母细胞的质量,包括纺锤体的形态、位置、稳定性等关键指标,为后续的受精和胚胎发育提供重要参考。昆明纺锤体提高冷冻保存效率纺锤体微管的动态变化是细胞分裂过程中引人注目的现象之一。
纺锤体观测仪使ICSI更加安全可靠
在进行单精子卵胞浆内注射(ICSI)授精时,**初人们观察人体内成熟的卵母细胞时,通常认为,卵母细胞纺锤**于***极体附近,故传统的ICSI操作是转动卵母细胞使其***极**于6点或12点处,然后在3点处注入精子。但是,在大量使用纺锤体观测仪后发现,***极体并不能很好地预测纺锤体的位置。一项研究提示,在ICSI后,用纺锤体观测仪观察纺锤体与***极体的夹角,结果发现小于30°这组卵母细胞的正常受精率更高。极体在卵周隙中的移动,或者纺锤体在胞质中的易位都使两者的位置关系发生改变,普通光学显微镜下ICSI穿刺部位的选择,可能会损伤纺锤体和(或)造成染色体的异常。通过纺锤体观测仪,可以精确地对卵母细胞中纺锤体的位置进行定位,从而避免在ICSI过程中损伤纺锤体,使ICSI更加安全可靠。有文献报道,在进行ICSI时,观察到“双折射纺锤体”的成熟卵母细胞的受精率和质量胚胎率***高于未观察到双折射纺锤体组。也有学者发现,有些卵母细胞在普通光学显微镜下看到是正常的,但在纺锤体观测仪这个“照妖镜”下,就能显出原形,表现为有***极体、但缺乏双折射的纺锤体,这类卵母细胞ICSI后的受精率和妊娠率极低。
纺锤体,顾名思义,其形状类似于纺织用的纺锤,是在细胞分裂前初期到末期形成的一种特殊细胞器。它的主要元件包括微管、附着微管的动力分子分子马达,以及一系列复杂的超分子结构。微管是纺锤体的基础骨架,由αβ-微管蛋白二聚体组成,这些微管相互交错,形成纺锤状结构,将染色体紧密地联系在一起。在动物细胞中,纺锤体的形成和组装通常由中心体引导和控制。中心体是一个位于细胞质中的复合体,由两个中心粒嵌套在被称为pericentriolarmaterial(PCM)的区域内组成。PCM富含微管相关蛋白和其他蛋白质,如谷氨酸脱羧酶等微管主要蛋白,这些蛋白质共同协作,确保纺锤体的正确组装和稳定。相比之下,高等植物细胞的纺锤体并不包含中心体,而是由细胞极板附近的微管组织形成。纺锤体,作为细胞分裂的“引擎”,驱动着生命的延续与多样性。
解冻后的卵母细胞在无损观察技术的支持下,可以直接进行纺锤体观察,无需进行任何形式的固定和染色处理。这一技术能够迅速评估解冻后卵母细胞的质量,包括纺锤体的形态、位置、稳定性等关键指标,为后续的受精和胚胎发育提供重要参考。无损观察纺锤体技术已逐步应用于临床辅助生殖技术中。医生可以在不破坏卵母细胞活性的情况下,通过该技术评估其质量并选择合适的卵母细胞进行受精和胚胎移植。这不仅提高了妊娠率和胚胎质量,还减少了因卵母细胞质量不佳而导致的移植失败和流产风险。纺锤体微管的正极朝向细胞两极,负极则靠近染色体。深圳辅助生殖纺锤体起偏器
纺锤体形成过程中的任何错误都可能影响细胞的命运。哺乳动物纺锤体Hoechst染料
染色体
当细胞从间期进入有丝分裂期,间期细胞微管网络解聚为游离的αβ-微管蛋白二聚体,再重组成纺锤体,介导染色体的运动;分裂末期纺锤体微管解聚,又重组形成细胞质微管网络。
可分为:动粒微管:连接染色体动粒于两极的微管。
极间微管:从两极发出,在纺锤体中部赤道区相互交错的微管。
星体微管:中心体周围呈辐射分布的微管。
染色体的运动依赖纺锤体微管的组装和去组装。在这一过程中动粒微管与动粒之间的滑动主要是依靠结合在动粒部位的驱动蛋白和动力蛋白沿微管的运动来完成。极微管在纺锤体中部交错,有些分布在极微管之间特殊的双极马达蛋白,其中2个马达蛋白沿一条微管运动,另2个马达结构域沿另一条微管运动。由于2条微管分别来自二极,故极性相反。当双极驱动蛋白四聚体沿微管向正极运动时,纺锤体二极间距离延长。反之纺锤体距离缩短。 哺乳动物纺锤体Hoechst染料
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