在生殖医学领域,卵母细胞的冷冻保存技术一直是研究的热点,旨在提高女性生育能力的保存与利用。然而,传统的纺锤体观察方法往往需要对卵母细胞进行固定和染色处理,这不仅破坏了细胞的活性,还限制了对其发育潜能的深入评估。偏光成像技术,特别是Polscope偏振光显微成像系统,通过利用纺锤体微管结构的双折射性,实现了对纺锤体的无损观察。这种技术无需对卵母细胞进行固定和染色,能够在保持细胞活性的同时,实时、动态地观察纺锤体的形态和变化。这不仅提高了观察的准确性和可靠性,还避免了传统染色方法可能带来的细胞损伤和误差。纺锤体的一端连接着染色体,另一端则锚定在细胞两极。美国哺乳动物纺锤体揭示卵母细胞关键结构
在纺锤体卵冷冻过程中,利用纺锤体实时成像技术可以实时监测纺锤体的变化。通过观察冷冻过程中纺锤体的形态、位置及动态变化,研究者可以判断冷冻保护剂的效果、冷冻速率等因素对纺锤体的影响,从而优化冷冻方案,减少纺锤体损伤。解冻后,利用纺锤体实时成像技术可以对卵母细胞内的纺锤体进行再次评估。通过比较解冻前后纺锤体的形态和稳定性,研究者可以判断冷冻过程对纺锤体的损伤程度,并筛选出纺锤体形态完好的卵母细胞进行后续操作,提高受精率和胚胎发育质量。昆明无损观察纺锤体透明带纺锤体微管的动态变化是细胞分裂周期的重要标志。
纺锤体的双极化是卵母细胞减数分裂过程中的关键事件之一。近年来,我国学者在人类卵母细胞纺锤体双极化机制研究方面取得了重要进展。通过高分辨成像技术,研究者们揭示了人类卵母细胞纺锤体双极化的独特机制,并发现了调控此过程的关键蛋白。这些研究成果不仅为双折射性纺锤体卵冷冻研究提供了新的视角和思路,也为临床生殖障碍疾病的诊疗提供了科学依据。随着偏光成像技术和冷冻保护剂研究的不断深入,未来有望开发出更加高效、安全的卵母细胞冷冻保存方案。例如,通过改进冷冻速率和程序、优化保护剂配方等手段,进一步减轻冷冻损伤,提高解冻后卵母细胞的存活率和发育潜能。
纺锤体是如何形成的(2)
动粒微管连接染色体动粒与位于两极的中心体。在有丝分裂前期,一旦核被膜解聚,由相反两个方向的中心体伸出的动粒微管就会随机地与染色体上的动粒结合而俘获染色体,微管**终附着在动粒上,动粒微管把染色体和纺锤体连接在一起。在细胞分裂期的后期,分开后的染色单体被拉向两极。染色体移动由两个相互独立且同步进行的过程所介导,分别为过程A和过程B。在过程A中,在连接微管和动粒的马达蛋白的作用下,动粒微管解聚缩短,在动粒处产生的拉力使染色体移向两极。极间微管是从一个中心体伸出的某些微管与从另一个中心体伸出的微管相互作用,阻止了它们的解聚,从而使微管结构相对稳定,两套微管的这种结合形成了有丝分裂纺锤体的基本框架,具有典型的两极形态,产生这些微管的两个中心体称为纺锤极,这些相互作用的微管被称为极间微管。在有丝分裂后期过程B中,极间微管的伸长和相互间的滑行使纺锤极向两极方向移动。星体微管从中心体向周围呈辐射状分布,在有丝分裂后期过程B中,每一纺锤极上向外伸展的星体微管发出向外的力,拉动两个纺锤极向两极方向移动。
显微镜下的纺锤体,如同精密的分子机器,引导染色体分离。
卵母细胞纺锤体对低温环境极为敏感,冷冻过程中可能发生的冰晶形成、溶液浓缩等物理化学变化均会对纺锤体造成损伤,导致其形态异常、稳定性下降。在冷冻和解冻过程中,纺锤体微管可能发生解聚和重聚,这一过程不仅影响纺锤体的形态,还可能破坏其内部结构和功能,进而影响卵母细胞的发育潜能。为了减轻冷冻损伤,研究者们尝试在冷冻液中添加细胞骨架保护剂,如紫杉醇等。然而,保护剂的选择、浓度及作用机制仍需进一步研究和优化。纺锤体微管的动态变化受到细胞周期蛋白的调控。美国哺乳动物纺锤体Oosight Meta
纺锤体微管的排列方向决定了染色体分离的方向。美国哺乳动物纺锤体揭示卵母细胞关键结构
纺锤体观测新技术提升“试管婴儿”胚胎受精率
什么是纺锤体观测仪?
纺锤体观测仪是利用光线经过双折射性的物体时产生的光程差,对卵母细胞内的纺锤体进行动态及无创观察的显微观测系统。
纺锤体观测仪主要有什么用处?
纺锤体观测仪主要用于ICSI注射时纺锤**置观测,避免ICSI注射时对卵子的纺锤体损伤。
目前的ICSI注射方法是:假定成熟的MII卵母细胞的纺锤体靠近***极体,通过定位***极**置于6点或12点方向,在垂直于***极体的3点钟方向注入精子。但事实上,纺锤体的位置不是固定不变的,***极体不能精细预测所有卵母细胞纺锤体的位置,约39%的纺锤体并不能通过***极体预测。传统的ICSI注射很可能损坏纺锤体,若纺锤体损伤很可能导致卵母细胞死亡或染色体异常。因此,在ICSI注射时对纺锤体进行观察,对于ICSI操作和受精结局都有非常重要的意义,可以显著提高ICSI受精率,有大量文献报道正常受精率在观察到纺锤体的卵子中***高于未观察到纺锤体的卵子(83.3% VS 77.2%)。
纺锤体仪还有什么作用?
纺锤体观测仪还可以对一代受精后的卵母细胞受精情况进行评估,选择未受精的卵母细胞进行补救ICSI***。 美国哺乳动物纺锤体揭示卵母细胞关键结构
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