纺锤体的完整性决定了染色体分裂的正确性。在有丝分裂前期,中心体被复制形成两个中心体,并逐渐分离,形成两个纺锤体。纺锤体的微管从中心体发出,与染色体上的着丝粒(kinetochore)结合。着丝粒是一组复杂的蛋白质结构,可以与微管的末端结合。当纤维束的微管末端与着丝粒结合时,纤维束开始缩短,将染色体拉向两端,实现染色体的精确分离。这一过程不仅确保了每个新细胞都能获得正确数量的染色体,还保证了遗传信息的稳定传递。纺锤体在细胞分裂后期通过收缩力推动染色体分离。香港无需染色纺锤体卵质量评估
为了减少冷冻过程中纺锤体的损伤,研究者们尝试在冷冻液及解冻液中添加细胞骨架保护剂,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能够稳定微管结构,防止其在低温下解聚。通过偏光成像技术,研究者可以实时监测紫杉醇对纺锤体的保护效果,评估其在冷冻保存过程中的作用机制。此外,还可以进一步观察解冻后卵母细胞的发育潜能,为临床应用提供可靠依据。无需对细胞进行固定和染色,保持细胞的活性与完整性。能够实时监测纺锤体的形态变化,评估冷冻效果。能够捕捉到细微的纺锤体形态变化,提高评估的准确性。上海ICSI纺锤体起偏器纺锤体微管的数量和分布随细胞分裂阶段而变化。
染色体
当细胞从间期进入有丝分裂期,间期细胞微管网络解聚为游离的αβ-微管蛋白二聚体,再重组成纺锤体,介导染色体的运动;分裂末期纺锤体微管解聚,又重组形成细胞质微管网络。
可分为:动粒微管:连接染色体动粒于两极的微管。
极间微管:从两极发出,在纺锤体中部赤道区相互交错的微管。
星体微管:中心体周围呈辐射分布的微管。
染色体的运动依赖纺锤体微管的组装和去组装。在这一过程中动粒微管与动粒之间的滑动主要是依靠结合在动粒部位的驱动蛋白和动力蛋白沿微管的运动来完成。极微管在纺锤体中部交错,有些分布在极微管之间特殊的双极马达蛋白,其中2个马达蛋白沿一条微管运动,另2个马达结构域沿另一条微管运动。由于2条微管分别来自二极,故极性相反。当双极驱动蛋白四聚体沿微管向正极运动时,纺锤体二极间距离延长。反之纺锤体距离缩短。
纺锤体生成
在含中心体的细胞中,纺锤体的生成开始于细胞分裂前初期 - 即在细胞核膜分解(Nuclear Envelope Breakdown, NEB)之前。初期的结构为两个**的以中心体为核的星状体(asters)。当细胞核膜分解后,染色体和星状体发生一系列复杂的互动反应。**终结果为所有的染色体在纺锤体的**(赤道板,)排列整齐,每两条染色体有一个着丝点,每一个着丝点被一束极性相同的微管(通常称为纺锤丝)附着。此时细胞处于分裂中期,纺锤体生成完毕。实验证明,中心体在这个过程中的作用不是必需的。动物细胞在中心体被激光捣毁后仍旧能够筑构纺锤体,但其位置通常不在细胞的大致几何中心,其后的胞质分裂也会受严重影响。纺锤体 [1]
在不含中心体的细胞中,纺锤体的生成是由染色体本身主导的。此过程由一小分子量的GTP连接蛋白(Ran GTPase)控制。细胞核分解后,纺锤丝由染色体周围生成。其后这些纺锤丝会在动力分子与为微管动力的合作影响下自动排列为极性相反大致数目相同的两组。每组的极性相对于一组着丝点。同时在微管远端的动力蛋白 dynein 会将这些微管束集中到一点,形成纺锤极区(Spindle Polar Zone)。与此同时,染色体会自动在赤道板排列整齐。纺锤体生成完毕。 纺锤体的一端连接着染色体,另一端则锚定在细胞两极。
在纺锤体卵冷冻过程中,利用纺锤体实时成像技术可以实时监测纺锤体的变化。通过观察冷冻过程中纺锤体的形态、位置及动态变化,研究者可以判断冷冻保护剂的效果、冷冻速率等因素对纺锤体的影响,从而优化冷冻方案,减少纺锤体损伤。解冻后,利用纺锤体实时成像技术可以对卵母细胞内的纺锤体进行再次评估。通过比较解冻前后纺锤体的形态和稳定性,研究者可以判断冷冻过程对纺锤体的损伤程度,并筛选出纺锤体形态完好的卵母细胞进行后续操作,提高受精率和胚胎发育质量。纺锤体微管的动态变化是细胞分裂过程中引人注目的现象之一。北京卵母细胞纺锤体起偏器
纺锤体的形成需要多种蛋白质的精确协作与调控。香港无需染色纺锤体卵质量评估
选择合适的冷冻保护剂是减少冷冻损伤的关键。然而,不同浓度的冷冻保护剂对MI期卵母细胞纺锤体的影响各异,需要通过大量实验进行优化。此外,冷冻保护剂的渗透性和毒性也是需要考虑的因素。冷冻和解冻过程中的温度控制、时间控制以及操作手法等都会对MI期卵母细胞的纺锤体造成影响。因此,需要不断优化冷冻和解冻程序,以减少对纺锤体的损伤。近年来,研究者们通过不断尝试和优化冷冻保护剂的配方,取得了进展。例如,一些研究表明,使用高浓度的蔗糖作为冷冻保护剂可以提高MI期卵母细胞的存活率和纺锤体稳定性。此外,还有一些新型冷冻保护剂如乙二醇、丙二醇等也被应用于MI期卵母细胞的冷冻保存中。香港无需染色纺锤体卵质量评估
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