病毒采样管是一种通用的采样产品,可以快速灭活病毒,可以保证检测人员的风险还避免了气溶胶的风险。还可以用于各种病毒样品、衣原体样品包括近肆虐全球的原样品的取样,可以进行2~8天的短期储存和运输,在-70℃或液氮环境中长期储存。如果需要长途运输,建议使用冷链运输,避免采样管的样本错过了检测的比较好时期。
病毒采样管用于临床流感、禽流感、手足口病、麻疹、等病毒标本和支原体、解脲支原体、衣原体等标本的采集和运输,可以有效的灭活病毒,避免气溶胶的风险 灭活型病毒保存液的主要优点是方便,快速,安全,缺点是检出率偏低;样品保存液****
一次性使用病毒采样管(灭活型)的特点:
①、操作使用简单,无需配液,体系内含有高效病毒裂解液,采样后即刻灭活病毒,有效防止二次风险,保障运输及检测人员安全
②、病毒DNA/RNA可在常温保存与运输1周不降解,按大多数商业化试剂盒进行提取后,获得的DNA或者是RNA质量好,得率高,可完成各种基因检测及分析实验,如PCR或者是qPCR等,同时节省运输成本
③、内含核酸RNA酶抑制剂,很大程度保护病毒核酸稳定不被降解,大幅提高核酸提取效率。适用于、流感病毒、手足口病毒等常见的病毒样本采集保存运输工作,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或者纯化等临床试验。 河源细胞保存液生产厂家病毒核酸检测过程中,病毒保存液的作用尤其重要,我们的检验工作不可能在采集到样本后就立马进行检测。
市场上使用的病毒保存液主要有两种,一种是以运送培养基为基础改良的病毒维持液,另一种则为核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基础培养液(MEM)或Hank's平衡盐,添加了病毒生存所需的盐类、氨基酸、维生素、葡萄糖以及蛋白质,这种保存液使用酚红钠盐做为指示剂,溶液pH值在6.6-8.0时溶液呈粉红色。保存液中添加了必须的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白质,蛋白质的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以稳定病毒的蛋白质外壳。由于保存液营养成分丰富,有利于病毒的成活但是也有利于细菌的生长,如果保存液中污染了细菌,则会大量繁殖,其代谢产物中的二氧化碳会使保存液pH值下降,从粉红色变为黄色。因而大多数厂家都在配方中添加了抑菌剂成分,推荐使用的抑菌剂为青霉素、链霉素、庆大霉素及多粘菌素B等,不推荐使用叠氮钠、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制剂,因为这些组分对PCR反应有影响。由于这种保存液提供的样本基本是活病毒,可以很大程度保持样本的原始性,后续不仅可以用于病毒的核酸提取检测,还能用于病毒的培养和分离。但是用于检测时应该注意的是必须灭活以后再进行核酸提取纯化。
灭活型病毒保存液的原理:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作员二次,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,后续的实验只要能检测出病毒的核酸即可以做出诊断。而且能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样品保存以及运输的成本。
非灭活型病毒保存液的原理:
它同时保留了病毒的蛋白质外壳以及病毒核酸DNA或者RNA,这样就可以保证病毒样本核酸在送检过程中的完整性,虽然操作失误时会也有一定的性风险,但是这种保存液很大程度地保持了病毒样本的原始性,是一种培养型的病毒运输介质,需要注意的是采样后长时间保存需要保持严格低温保存。
而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测,所以在保存和运输时,就需要加入病毒保存液。
灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液体含有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,后续的NT-PCR实验只要能检测出病毒的核酸既可以做出诊断。而且能够在常温下保存相对较长的时间。
病毒的检测不同于常规的生化检测,病毒本身是一种结构简单的微生物,必须 寄生在活细胞内。采样后,病毒离开寄主细胞,在采样管内其蛋白质外壳和核酸都会很快降解,这样核酸检测时就无法判断初始采集的样本是否含有病毒,容易造成假阴性。 而且能在常温下保存相对较长的时间,节省了病毒样本保存以及运输的成本。河南细胞保存液批发价格
禁止将已置入了病毒样本的保存液直接接触被采集人员。样品保存液****
前面已经说灭活病毒保存液可以使病毒失去活性,失去活性后是怎么来进行检测的呢?我们使用灭活型保存液的目的是裂解核酸,释放核酸然后通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,通过这种方法来判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否了病毒。而病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。通常我们在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行运输和保存的,因此我们就需要对采集到的病毒拭子进行运输和保留,不然病毒核酸会很快降解就无法检测到核酸了,所以就需要往采样管里加保存液来让病毒的核酸不要那么快被降解。样品保存液****
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