裸鼠瘤模型是比较常见和常用的一种瘤动物模型,它在皮下移植瘤瘤模型的建立中起到重要作用。裸鼠瘤模型的接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式。裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高、易于操作、成本低的优点。
造模方法:
1、细胞是贴壁细胞,细胞培养在RPMI-1640培养基中细胞传代培养:当细胞长至80-90%时,去除培养基,加入PBS洗1-2次,去除PBS后,加入1ml胰酶消化1-3min后,加入3ml完全培养基中和胰酶终止消化,将消化的细胞转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min。倒掉上清后,加入3ml培养基重悬细胞,1:3传代至培养皿中培养。
2、将长到培养皿80%-90%的细胞用胰酶消化下来,1000rpm离心,去除上清,加入完全培养基重悬细胞,将细胞分别种在6孔板中,每孔种1×105个细胞。
3、将细胞进行扩增培养,对细胞进行计数,将数量调整为2×107个细胞/ml。5、8周龄15只裸鼠适应性饲养7天后,随机分为3组,每组分别在右腋皮下接种2×106(100ul/只)细胞。接种约两周后出现结节,每周瘤大小两次。将裸鼠放入鼠笼中正常饲养4周后处死裸鼠,取裸鼠瘤拍照冻存。 英瀚斯生物,可承接实验动物模型药效实验。辽宁承接实验动物模型外包公司
肝炎实验动物模型
6.1自身免疫性肝病动物模型应用成年豚鼠,在无菌条件下,先使豚鼠肝素化,而后用生理盐水经门脉进行肝脏灌流,剪断动、静脉以驱除肝内存血。除去胆囊、胆管及其他组织。将肝剪成小块,再以生理盐水浸洗直至无血色。取湿重10g的肝组织,加100ml生理盐水,在组织匀浆器中以8000转/分转4min制成10%的肝悬液。按1:1的比例加入弗氏佐剂,用小注射器往返抽注制成乳剂。成年豚鼠用上述乳剂腹腔注射2ml及4个足垫皮内注射0.1ml。每周一次,免疫1个月后,肝脏内可发生水肿样变性、嗜酸性坏死、肉芽肿样病灶、胆管上皮增生及淋巴细胞和嗜伊红细胞浸润。
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6.2转基因乙肝模型【操作步骤】构建人乙型肝炎病毒(HBV)全基因或部分基因质粒,通过转基因技术将乙型肝炎病毒插入到小鼠基因组上,形成能产生乙型肝炎的小鼠品系。【结果分析】乙型肝炎病毒转基因小鼠,有病毒复制,可用于研究HBV基因结构和功能、基因表达的调控、HBV的复制等。乙型肝炎病毒转基因小鼠会发生免疫逃避,不产生和人类乙型肝炎相近的病理表现。目前,中国医学科学院、***医学科学院、上海复旦大学和广州空军医院拥有乙型肝炎病毒转基因小鼠。 福建好的实验动物模型实验英瀚斯生物 专业承接各类实验动物模型!
蛛网膜下腔出血系由脑底或脑表部位的血管破裂,血液破入蛛网膜下腔引起。颅内动脉瘤,脑动、静脉畸形,血压高动脉硬化等为常见病因。蛛网膜下腔出血后可引起脑血管痉挛。因此,蛛网膜下腔出血和迟发性脑血管痉挛的模型有许多共同之处,造模时可同时作为参考。
英瀚斯熟练掌握蛛网膜下腔出血造模,及其他动物模型。
复制方法 :健康大鼠,雌雄不拘,体重为250~350g。将钓鱼线剪成长约50mm,并在18mm处作标记,酒精消毒后置于无菌生理盐水中备用。麻醉后仰卧固定,剃除颈部毛发,手术区域皮肤消毒。颈正中切口,分离右侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉,结扎、切断颈外动脉分支及颈总动脉分叉处小动脉,并游离颈外动脉主干,沿着颈内动脉暴露翼腭动脉,在颈外动脉残端放一丝线,使其呈一松结。在翼腭动脉起始部置一微动脉夹,同时夹闭颈总动脉及颈内动脉主干近端。在颈外动脉残端剪一小口,将制备好的栓线插入。此时将颈外动脉残端处丝线的松结拉紧,除去颈内动脉的动脉夹,继续将丝线沿着颈内动脉插入,直至感到有阻力,这时稍用力再插入1.0~1.5mm后有落空感即可抽出丝线并除去微动脉夹。栓线的直径及插入的深度根据动物的体重而定。
肾纤维化模型
1)单侧输尿管结扎法肾小管间质纤维化模型2)庆大霉素诱导肾小管间质纤维化模型1单侧肾静脉结扎法肾小管间质纤维化模型
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2实验方法
2.1单侧肾静脉结扎法体重为250~300g的成年SD大鼠,经腹腔注射5%水合氯醛麻醉,麻醉后取仰卧位固定于手术板上。动物腹部手术区常规消毒及去毛,沿腹中线作手术切口,依次切开皮肤和肌肉,游离肾脏和输尿管,用组织钳托起左侧输尿管中段部位,止血钳夹住,在两端用4-0号丝线分两次结扎左侧输尿管近肾盂段,剪断输尿管,然后常规缝合肌肉和皮肤。术后动物常规单笼饲养观察,自由饮水及进食。28d后出现纤维化。 英瀚斯生物 实验动物模型整体外包。
实验动物模型的案例。反义寡核苷酸(ASOs)是一种短的、化学合成的单链寡核苷酸,通过对其骨架和糖基进行修饰,可增加其稳定性、药理特性以及与靶标的结合,并通常具有较小的毒性。常用于细胞和动物体内基因功能研究以及ASO核酸药物的开发等。经过化学修饰的ASOs可以通过多种作用机制发挥作用。常见的一种作用方式是与RNA结合,形成RNA&DNA杂合体,依赖于RNase H发挥作用,从而导致靶标mRNA的降解,主要适用于干扰细胞核内的lncRNA/circRNA/mRNA等。实验动物模型的常见问题解答。福建好的实验动物模型实验
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氯化锂诱导大鼠癫痫模型实验动物模型
造模方法癫痫是一种以大脑局部细胞突发性的异常放电并向周围组织扩散为特征的大脑功能障碍,同时伴随暂时性运动、感觉、意识及自主神经功能异常。临产表现为强直阵挛。现在常用的急性化学致痫模型机制均是作用于神经元,通过对CNS递质的作用来诱发癫痫。大鼠腹腔注射氯化锂(LiCl)(127mg/kg,溶于水)进行诱发,24h后腹腔注射溴甲东莨菪碱(1mg/kg),30min后再以匹罗卡品(40mg/kg)腹腔注射,癫痫发作在注射匹罗卡品10到30分钟后开始。如果癫痫发作持续时间30min以上的给予10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射以中止发作,如果没有效果,可以反复注射10%水合氯醛直至发作停止。
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