免疫组化中免疫胶体金技术,英瀚斯生物小编为您说明介绍。免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶,它能迅速而稳定地吸附蛋白,对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此,用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针,就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位,甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒,且胶体金的电子密度高,所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色,因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。免疫组化常见问题原因分析!湖北切片免疫组化可以做什么
免疫组化的局限性:在病理诊断中,随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现,免疫组化在病理诊断和医疗中已有了很重要的位置,对于cancer诊断、鉴别诊断、分类及诸多方面产生了重大的影响。但是免疫组化技术还存在着缺陷和不足,作为病理医生和病理技术人员不仅要充分认识到缺陷和不足,而且要努力避免由于缺陷和不足给诊断带来的误区,这就要求病理医生和病理技术人员在工作中不断学习与研究,在实际操作中总结经验教训,分析失败原因,努力实现操作规范化、标准化,才能充分发挥免疫组化在病理诊断及鉴别诊断、临床医疗中的指导作用。湖北切片免疫组化可以做什么英瀚斯生物实验外包,多种病理染色熟练掌握,可做免疫组化!
免疫组化实验流程介绍:
英瀚斯生物为您整理总结免疫组化详细步骤:
1、SP三步法
1)石蜡切片,常规脱蜡至水。
2)0.3%或3%H2O2去离子水(无色液体)孵育10-30分钟,以灭活内源性过氧化物酶活性。
3)蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟
4)候选步骤:采用抗原修复:微波(建议30分钟内4次中火)、高压、酶修复方法。自然冷却,再用3分钟×3次.
5)血清封闭:室温15-30分钟,尽可能与二抗来源一致。倾去,勿洗。
6)滴加适当比例稀释的一抗,37℃孵育2~3小时或4℃过夜(比较好复温)。PBS冲洗,3分钟×5次。
7)滴加生物素标记的二抗,室温或37℃孵育30分钟-1h。
8)PBS冲洗,3分钟×5次。
9)滴加SP(链霉亲和素-过氧化物酶),室温或37℃孵育30分钟-1h。
10)PBS冲洗,3分钟×5次。
11)显色剂显色(DAB等)。
12)自来水充分冲洗。
13)可进行复染,脱水,透明。
14)选择适当的封片剂封片。
免疫组化临床应用中,可以对传染性疾病诊断。应用抗病毒、细菌、zhen菌和寄生虫抗原的特异性抗体进行免疫组化染色,可以检测和诊断许多传染性疾病病原微生物,如乙型肝炎病毒(HBV)、巨细胞病毒(CMV)、人乳T状瘤病毒(HPV)、疱疹病毒(HSV)、丙型肝炎病毒(HVC)、细小病毒B19、人禽流行性感冒病毒(AIV)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS)等等,由于免疫组化在传染性疾病诊断中具有及时性、低风险性、高敏感性、特异性、有效性等特点,可以用于(1)用于人类新病原微生物的识别;(2)提供快速的形态学诊断,使严重传染性疾病得以早期医疗;(3)在无法取得新鲜组织或尚无培养方法的情况下,提供诊断并对发病机制进行研究和认识。英瀚斯生物专业做实验外包服务,一站式医学科研平台。免疫组化protocol,详情请看英瀚斯生物官网。
免疫组化(IHC)利用抗体检测组织切片中蛋白质和其他抗原的定位。
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抗体-抗原的相互作用通过有色酶底物显色检测或荧光染料荧光检测进行观察。虽然IHC在定量方面不如蛋白质印迹或ELISA,但是IHC可以提供完整组织中蛋白定位的宝贵信息。蛋白表达谱对病理学家以及作为诊断工具都具有重要意义。
IHC实验成功的关键在于稳定、优化且可重复的染色方案,而该方案应使用高质量的特异性试剂。 大鼠、小鼠组织免疫组化,找英瀚斯生物。湖北切片免疫组化可以做什么
做免疫组化的目的是什么?湖北切片免疫组化可以做什么
病理医师日常工作中经常说的一句话应该就是“做个免疫组化吧”;不管是临床医师,还是患者,他们问的多的问题则是“为什么要做免疫组化?”病理医师通过“特殊染色”来进行细胞的识别。这一做法的依据是特定细胞和组织中的成分不同、则化学性质不同,通过染色的方法则可以呈现不同颜色。不过,由于组织固定或储存等,会造成相应物质的活性降低甚至消失,因而限制了特殊染色方法的应用。随着免疫学研究的进展,根据抗原与相应抗体间特异性结合的性质,则有了现在免疫组化的方法:不同细胞、不同组织中抗原有一定差异,抗体与被测组织中的特定抗原结合,进而通过一定显色方法将结合的抗体显示出来。如有相应显色,则证实可能有被测抗原;无显色则可能无被测抗原。当然,这一方法中需注意相应的“例外”,如抗体的非特异性结合、非特异性显色,则容易造成“假阳性”;或者虽有相关抗原、但所用抗体与该抗原并未结合等,则容易造成“假阴性”。随着免疫组化的应用经验的增加,这些问题在常规应用中尽量得以避免,前者如各种显色方法的优化;后者如抗原修复方法的优化、新型抗体开发及选择。湖北切片免疫组化可以做什么
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