免疫组化指的是根据抗体与抗原特异结合的原理来检测组织切片中的抗原(如蛋白)。immuno的词根来自操作中所使用的抗体,而histo意味着组织。另一种类似的技术是免疫细胞化学(Immunocytochemistry,简称ICC)。这两个词大家经常混着用,看着好像差不多,但实际上还是有点区别。IHCvsICC对于IHC,组织是来自患者或动物,经过冷冻或石蜡包埋。将这些组织制成约4μm厚的切片,封片后再处理。通过这种方法,研究人员可观察细胞组分的定位,同时维持周围组织的原先结构。对于ICC,大部分细胞外基质及其他基质组分被去除,只剩下整个细胞来染色。ICC的来源可以是细胞悬液,来自患者或动物(如血涂片、拭子等),或在实验室中进行的组织培养细胞系。 英瀚斯实验外包,病理染色切片免疫组化,效率高!山东大鼠免疫组化注意事项
免疫组化技术有哪些应用?
定位和定性是免疫组化比较大的优势。相比于其他蛋白检测方法,免疫组化具有定位较直接准确、定性灵敏度高,是定位检测分析优先方法,尤其对于有些因子的转位研究十分有用。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面:恶性**的诊断与鉴别定性;确定转移性恶性**的原发部位;对某类**进行进一步的病理分型;软组织**诊断;为临床提供治疗方案的选择;近年来,随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现,使许多疑难**得到了明确诊断。免疫组化在**诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可,其在低分化或未分化**的鉴别诊断时,准确率可达50%-75%。
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免疫组化的抗原修复技术
抗原修复是免疫组化实验中的重要步骤,目的是暴露被固定过程掩盖的抗原表位。常用的抗原修复方法有热修复和酶消化。免疫组化热修复是通过加热(如微波或高压)使蛋白质变性,暴露抗原表位。常用的缓冲液有柠檬酸盐缓冲液和EDTA缓冲液。酶消化是通过蛋白酶(如胰蛋白酶)消化部分蛋白质,暴露抗原表位。免疫组化实验中不同的抗原修复方法适用于不同的抗原和抗体,需要根据免疫组化具体实验条件进行优化调整。
免疫组化的抗原修复
很多抗原的可视性可以通过抗原修复来提高,抗原修复可以打破福尔马林固定时形成的蛋白质交联,从而使被掩藏的抗原显现出来。抗原修复技术包括不同时间长度的加热或者利用蛋白酶来做酶消化,例如蛋白酶K,胰蛋白酶或胃蛋白酶。加热的方法通常会用到微波炉,高压锅,蒸箱或水浴。将样品在接近100°C高温加热20分钟后再冷却同等的时间。**常用的抗原修复液有a)柠檬酸盐缓冲剂,pH6.0,b)Tris-EDTA,pH9.0和c)EDTA,pH8.0.如需要可用柠檬酸盐缓冲剂做抗原修复:柠檬酸盐缓冲剂配方:10mM柠檬酸钠,0.05%Tween-20,pH6.0或10mM柠檬酸,0.05%Tween-20,pH6.0将含有柠檬酸钠或柠檬酸盐缓冲剂的染色盘放到蒸箱或者水浴中,预热到95-100°C。将切片浸没于染色盘中。盖子虚掩,孵育20-40分钟(研究者需自己决定比较好的孵育时间)。关掉蒸箱或水浴,将染色盘置于室温下,让切片冷却20分钟。在TBS-Tween-20中漂洗切片2次,每次2分钟。开始封闭步骤。 病理报告中的免疫组化到底有什么作用?
免疫组化的局限性:在病理诊断中,随着各种抗体新的用途不断被发现及越来越多的新型抗体的出现,免疫组化在病理诊断和医疗中已有了很重要的位置,对于cancer诊断、鉴别诊断、分类及诸多方面产生了重大的影响。但是免疫组化技术还存在着缺陷和不足,作为病理医生和病理技术人员不仅要充分认识到缺陷和不足,而且要努力避免由于缺陷和不足给诊断带来的误区,这就要求病理医生和病理技术人员在工作中不断学习与研究,在实际操作中总结经验教训,分析失败原因,努力实现操作规范化、标准化,才能充分发挥免疫组化在病理诊断及鉴别诊断、临床医疗中的指导作用。免疫组化技术的原理、分类和优点!浙江动物组织免疫组化哪家好
常见的免疫组化方法有哪些?山东大鼠免疫组化注意事项
确定cancer分期,免疫组化技术应用于临床可以进行处理哦,英瀚斯生物为您处理。cancer分期是判断预后的一个指标,与是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭密切相关,而通过免疫组化方法可以判断cancer是否浸润、有无淋巴管或血管侵袭。层黏连蛋白和Ⅳ型胶原的单克隆抗体可以清楚的显示基膜的主要成分,用于区分原位*和浸润*,一旦上皮性*突破基膜为浸润,未突破基膜为原位;显示血管和淋巴管内皮细胞的标记物第八因子相关蛋白、D2-40等则可清楚显示cancer对血管或淋巴管的浸润。因此对许多cancer的良恶性鉴别及有无血管或淋巴管浸润,免疫组化结果作为主要的鉴别依据。山东大鼠免疫组化注意事项
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