TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。这种实验方法在神经科学和医学研究中被广泛应用,用于研究和理解脑梗(中风)对动物平衡和协调性的影响。上海快速制作脑梗MCAO模型TTC染色
脑梗MCAO模型成功的评判方法主要包括以下几个方面: 1.脑梗死面积的评估:通过TTC(2%,17分钟)染色法对脑梗死面积进行分析和量化。在染色后,利用ImageJ图像分析软件对切片进行处理,从而得到脑梗死面积的数据。实验过程中,通过比较不同处理组之间的脑梗死面积,可以评估模型的成功率。 2.神经功能缺损评分:参照Zea-Longa评分标准,对实验动物在再灌注期内的神经功能进行评估。评分越高,表示神经功能缺损越严重。通过对不同处理组的神经功能缺损评分进行比较,可以进一步验证模型的成功。 3.梗死血管的观察:通过激光多普勒血流仪检测相对脑血流动脉减少情况,评估梗死血管的狭窄程度。同时,观察血管造影剂在梗死区域的分布情况,以判断血管阻塞的效果。定制脑梗MCAO模型研究方案小鼠脑梗模型可以适用于多种研究目的,如药物筛选、功能研究、疾病治*等。
脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中,占脑卒中总数的 60% ~ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因,但研究发现,缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。 通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。
将小鼠进行呼吸诱导麻醉(异氟烷)后,以仰卧位固定于操作台上,继续维持麻醉,常规消毒,备皮,取颈部正中切口,分离右侧颈部总动脉(CCA)、劲内动脉(ICA)和颈外动脉(ECA),结扎ECA远心端,在ECA起始端留置结扎线,用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断,将ECA拉至与ICA成一条直线,于结扎线近端用显微剪剪一斜口,将MACO栓线缓缓送入,栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后,单道结扎ECA近心端结扎线,使栓线与血管相对固定,随即松开ICA上的动脉夹,缓慢上提ECA近心端结扎线,将栓线缓慢送入,进线至线栓刻度位置。 缺血后再灌注:栓线插入40 min后拔出,随后将ECA近心端结扎线结扎,松开CCA近心端动脉夹,碘伏消毒后逐层缝合切口。通过观察动物的行为表现,对动物的神经功能缺损程度进行评分,以评估脑梗死后对动物神经功能的影响。
通过神经功能缺损评分,研究人员可以定量地评估脑梗死后对动物神经功能的影响。这对于研究脑梗死的病理过程、治*方法以及药物效果具有重要的意义。同时,这种评分方法也可以为临床医生提供参考,帮助他们更好地评估患者的神经功能缺损程度。 需要注意的是,神经功能缺损评分只是一种评估方法,不能完全戴*动物的神经功能状态。因此,在实验中还需要结合其他指标和方法进行综合评估。此外,由于实验动物的个体差异和环境因素的影响,实验结果也可能存在一定的误差。因此,在进行实验研究时需要严格控制实验条件和操作过程,以保证实验结果的准确性和可靠性。在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。当阻断血管达到120 min或更长时间时,会影响下丘脑的供血,导致自发性高热,影响实验结果。上海定制脑梗MCAO模型
这种模型有助于研究脑梗的发病机制,并寻找新的治*策略。上海快速制作脑梗MCAO模型TTC染色
此外,实验外包团队还具备专业的技术知识和技能。他们能够根据科研人员的具体需求,提供针对性的技术支持和解决方案。在实验过程中,他们能够及时发现并解决问题,确保实验的顺利进行。 除了技术方面的支持,实验外包团队还能够为科研人员提供其他方面的帮助。例如,他们可以帮助科研人员制定实验方案、优化实验流程、提高实验效率等。同时,他们还能够协助科研人员撰写实验报告、整理实验数据、进行数据分析等。 总之,实验外包团队在科研领域中扮演着重要的角色。他们具备较高的学历和丰富的实验操作经验,能够为科研人员提供专业的技术支持,确保实验的准确性和可靠性。在科研过程中,与实验外包团队的合作能够帮助科研人员更好地完成实验任务,提高科研成果的质量和水平。上海快速制作脑梗MCAO模型TTC染色