检测方法 造模完成后等待大鼠苏醒,依据Zea longa 5分制标准筛选出2分或3分的脑缺血模型进入后续实验。0分:无神经功能缺损症状,活动正常;1分:不能伸展对侧前爪;2分:爬行时出现向左转圈;3分:行走时身体向偏瘫侧倾倒;4分:不能自发行走,意识丧失。行为学指标目前常采用跳台法、避暗法、穿梭箱法来测定动物一次性被动回避反射能力 ; Y 形水迷宫实验、Morris水迷宫实验等测定动物空间分辨学习记忆能力。研究血管性痴呆、脑卒中抑郁症等可以选择旷场试验作为行为学检测指标之一。病理检测常用HE染色观察组织水肿炎症反应等,尼氏染色可以反应神经元细胞情况。这种模型有助于研究脑梗的发病机制,并寻找新的治*策略。北京艾菱菲生物脑梗MCAO模型周期短
TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。北京艾菱菲生物脑梗MCAO模型周期短麻醉时间,麻醉程度适中,过浅影响操作,过深导致死亡。
脑梗MCAO模型成功的评判方法主要包括以下几个方面: 1.脑梗死面积的评估:通过TTC(2%,17分钟)染色法对脑梗死面积进行分析和量化。在染色后,利用ImageJ图像分析软件对切片进行处理,从而得到脑梗死面积的数据。实验过程中,通过比较不同处理组之间的脑梗死面积,可以评估模型的成功率。 2.神经功能缺损评分:参照Zea-Longa评分标准,对实验动物在再灌注期内的神经功能进行评估。评分越高,表示神经功能缺损越严重。通过对不同处理组的神经功能缺损评分进行比较,可以进一步验证模型的成功。 3.梗死血管的观察:通过激光多普勒血流仪检测相对脑血流动脉减少情况,评估梗死血管的狭窄程度。同时,观察血管造影剂在梗死区域的分布情况,以判断血管阻塞的效果。
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。小鼠缺血性脑梗死模型也为神经康复研究提供了有力支持。
脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中,占脑卒中总数的 60% ~ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因,但研究发现,缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。 小鼠脑梗MCAO的构建 —艾菱菲生物整体外包一站式科研需求。南京脑梗MCAO模型TTC染色
线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机。北京艾菱菲生物脑梗MCAO模型周期短
此外,小鼠缺血性脑梗死模型还可以为神经科学研究提供更多启示。例如,研究者可以通过研究小鼠缺血性脑梗死后神经网络的改变,探讨神经连接与大脑功能的关系,进一步揭示大脑的工作机制。这对于理解神经精神疾病的发病机制、开发新型治*手段具有重要价值。 总之,小鼠缺血性脑梗死模型在研究脑梗死发病机制、药物开发、神经康复以及神经科学进展方面具有重要意义。通过深入研究小鼠缺血性脑梗死模型,我们可以期待为人类缺血性脑梗死的防治带来更多突破性进展,提高患者的生活质量和生存率。同时,这一模型也有助于推动我国脑科学研究的快速发展,为神经精神疾病的防治贡献力量。北京艾菱菲生物脑梗MCAO模型周期短