外泌体是细胞间进行物质运输和信息交流的重要工具,可以通过调节免疫功能促进**的增殖,血管新生和**转移。与病毒***,帮助病毒逃避免疫关系很大,并与心血管疾病,老年痴呆等疾病具有密切关系。由于外泌体直径小,样本含量低,提取十分困难。已有的外泌体分离方式有密度梯度离心、超滤离心法、免疫磁珠抗体捕获、商用试剂盒等。但到目前为止,仍没有一种提取方法能同时保证外泌体的含量、纯度以及生物活性。英瀚斯生物专业做外泌体相关实验。外泌体检测服务,选择一家专业放心的实验平台。江苏推荐的外泌体实验
外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白,是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合,有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现于早期以及回收的核内体中,RAB7 和 RAB9主要出现于晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白,外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白(包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等)。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9))、热休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33(结肠上皮细胞来源)、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素(不成熟的树突状细胞)。江苏推荐的外泌体实验外泌体与疾病的研究,南京英瀚斯生物。
外泌体中发现了一种特定的内泌体蛋白质亚群,表明外泌体发育过程中存在分选机制。转运所需的内体分选复合物(ESCRT)被普遍 认为是调控和引导特定分子进入MVBs腔内囊泡的途径。ESCRT,其4个主要复合物(ESCRT0,I,II,和III)负责传递用于溶酶体降解和蛋白质回收的泛素化蛋白。比较近的研究表明,特异性ESCRT家族蛋白的缺失可以改变外泌体的蛋白质含量和细胞释放外泌体的速率。更有趣的是,ESCRT系统的组件,如TSG101和Alix,被发现富集于外泌体,因此被用作外泌体鉴定的标记物。
外泌体的生物学功能取决于起源细胞和起源组织或细胞在外泌体产生时的状态。先前的研究表明,外泌体可能像细胞垃圾袋一样,排出多余和/或无功能的细胞成分。此外,内吞囊泡还参与细胞表面蛋白和信号分子的循环。**近的研究表明,外泌体在不同的生物过程扮演重要的角色, 如血管生成、抗原表达、细胞凋亡、凝固、细胞内稳态,炎症和细胞间信号。这些角色归因于能力转移核糖核酸,蛋白质,酶和脂质,从而影响生理和病理过程的各种疾病,包括**、神经退行性疾病、***和自身免疫性疾病。外泌体那些事儿,南京英瀚斯生物。
外泌体的主要功能被认为是细胞之间的信息传递,了解它带有的蛋白质和多种RNA上的信息就变得尤其重要。2019年外泌体中标项目中带有热门话题miRNA、lncRNA和环状RNA的项目数量,我们可以看到,外泌体中的miRNA和lncRNA过去研究的是比较多了,例如发表在Hepatology(IF=14.971)上的一篇文章表明肝ai细胞释放的外泌体miRNA调控巨噬细胞程序性死亡配体1的表达。另一篇文章发现胆管细胞来源的外泌体LncRNA H19促进肝星状细胞活化和胆汁淤积性肝纤维化。相对的,外泌体中的circRNA研究目前还较少,而circRNA分子自身独特的稳定性、组织特异性、时序和疾病特异性等,使它很有可能成为外泌体检测的下一个热门分子。外泌体鉴定透射电镜,英瀚斯生物。江苏推荐的外泌体实验
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外泌体鉴定透射电镜观察能够确认外泌体的形态学特征,但无法体现样本中所有外泌体颗粒的粒径分布情况及整体浓度;流式细胞仪可测定的粒径大小为150nm以上,并不适合检测游离的外泌体颗粒。英瀚斯生物采用基于马尔文Nanosight平台的纳米颗粒追踪分析 (Nanoparticle Tracking Analysis, NTA) 技术,快速、精细地分析外泌体粒径分布浓度,为外泌体存在提供有力证据。目前外泌体的提取方法主要可归纳为以下六种:一是超速离心法;二是过滤离心;三是密度梯度离心法;四是免疫磁珠法;五是PS亲和法;六是色谱法。江苏推荐的外泌体实验