迄今为止,缺血性脑卒中模型覆盖各种小型动物(小鼠,大鼠等)和较大型动物(兔、犬、猪、猴等),并应用于卒中治*药物的临床前药理药效研究。然而,自1970年代以来,大量在动物模型上得到验证的受试药物均未能在人体临床试验中获得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相对简单的动物模型不能准确模拟人类卒中的病理生理过程;2)临床前动物实验的药效评价方法尚难以成功转化到复杂的人体临床试验标准。2009年国际公认的“脑卒中治*学术工业圆桌会议”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)发布了临床前缺血性脑卒中药物研发准则,提出提高临床前药理药效研究质量的具体要求。近年来随着更深入的基础研究发现,更多符合人类发病机理和病理生理过程的缺血性脑卒中动物模型已被开发。建立大脑中动脉闭塞(MCAO)再灌注模型动物模型是研究此类疾病的*重要工具之一。北京快速制作脑梗MCAO模型
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。北京国内脑梗MCAO模型行为学检测艾菱菲生物科技有限公司坚持以客户为中心的服务理念,为客户提供#方位的服务和支持。
脑梗MCAO模型成功的评判方法主要包括以下几个方面: 1.脑梗死面积的评估:通过TTC(2%,17分钟)染色法对脑梗死面积进行分析和量化。在染色后,利用ImageJ图像分析软件对切片进行处理,从而得到脑梗死面积的数据。实验过程中,通过比较不同处理组之间的脑梗死面积,可以评估模型的成功率。 2.神经功能缺损评分:参照Zea-Longa评分标准,对实验动物在再灌注期内的神经功能进行评估。评分越高,表示神经功能缺损越严重。通过对不同处理组的神经功能缺损评分进行比较,可以进一步验证模型的成功。 3.梗死血管的观察:通过激光多普勒血流仪检测相对脑血流动脉减少情况,评估梗死血管的狭窄程度。同时,观察血管造影剂在梗死区域的分布情况,以判断血管阻塞的效果。
在成功建立小鼠脑梗模型后,认知功能的检测可以通过以下方法进行: 1. 迷宫测试:这是一个常用的方法,通过让小鼠在迷宫中寻找食物,观察其寻找食物的速度和正确性,来评估其认知功能。 2. 物体识别测试:给小鼠展示两个相似的物体,观察其是否能够正确识别并记住这两个物体。 3. 社交互动测试:观察小鼠与其他小鼠的互动情况,包括是否能够正确识别其他小鼠,以及是否能够进行正常的社交行为。 这些测试可以帮助评估小鼠的认知功能,从而了解脑梗对其认知功能的影响。实验外包团队具有丰富的实验操作经验。他们经多年的实践积累,对实验操作过程中的环节有着深入的了解掌握。
缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。麻醉时间,麻醉程度适中,过浅影响操作,过深导致死亡。上海脑梗MCAO模型水迷宫
MCAO是目前*广为接受一种药效模型。北京快速制作脑梗MCAO模型
小鼠缺血性脑梗死模型在推动我国脑科学研究的发展方面具有重要作用。通过这一模型,可以深入了解脑科学的各个方面,为神经精神疾病的防治提供有力支持。同时,模型还可以用于研究其他神经性疾病的发病机制和治*方法,为我国神经科学的发展做出贡献。 总之,小鼠缺血性脑梗死模型在研究脑梗死发病机制、药物开发、神经康复以及推动我国脑科学研究的发展等方面具有重要意义。随着科技的进步和研究的深入,我们相信这一模型将会为人类缺血性脑梗死的防治带来更多突破性进展,提高患者的生活质量和生存率。同时,这一模型也将有助于推动我国神经科学研究的快速发展,为神经精神疾病的防治贡献力量。北京快速制作脑梗MCAO模型