HE染色细胞质过染分析及应对原因:(1)伊红染色液浓度太高,特别是焰红燃料、四溴四氯荧光素钠的存在;(2)切片在伊红染色时间过长;(3)切片在伊红染色后经乙醇脱水步骤时过的太快,而使乙醇分化伊红的作用不能产生。对策:适当稀释伊红染色液,减少伊红染色时间,或者使切片在乙醇脱水等步骤时,停留时间相对均匀。同样,也要检查切片的厚度是否合适。切片中出现蓝黑色沉淀物分析及应对原因:苏木精染色液中的金属膜,黏附在玻片上。对策:每天染色前仔细过滤苏木精染色液,或建议使用半氧化苏木精染色液,如Gill苏木精染色液,可以避免过多的金属膜产生。冰冻切片是否可以做HE染色?西藏推荐的HE染色哪家好
HE染色在**染色中的应用,小细胞肺*是肺*中分化程度比较低、恶性程度比较高的一种恶性**,生长迅速,转移较早,五年存活率*为1%-2%,预后非常差。其小细胞肺***细胞HE染色的特征,主要表现为组织结构,包括巢状、小梁状、实性片状,常有菊形团形成,*巢周围的瘤细胞呈栅栏状排列,*细胞较小,一般小于三个静止的淋巴细胞,呈圆形、卵圆形或短梭形,胞质稀少,胞界不清,核染色质呈细颗粒状,核仁缺乏或不明显,核分裂象每十个高倍视野大于十一个,常见大片状坏死。四川HE染色分析HE染色取材和样本保存方式。
HE染色原理:易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。脱氧核糖核酸(DNA)两条链上的磷酸基向外,带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性染料以离子键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
HE染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。让您放心的实验外包公司,专业HE染色实验服务平台。
HE染色知识点1:对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的,应当在送检单上注明,有特殊要求(如细菌培养、解释道化学分析等)应当事先联系,并且在标本未固定前进行处理。知识点2:组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上,根据诊断的需要,确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记,以便镜检时核对。另外,尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影,并编号存档南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。脾脏组织HE染色如何观察。湖南病理HE染色多少钱
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HE染色样本组织固定与切片:首先将组织样本进行常规的石蜡包埋。在模具中加入液态石蜡,将待包埋的组织样本放入石蜡中,确保组织位置规整。补充少许液态的石蜡后,进行降温冷冻,使石蜡变为固态达到组织固定的效果,然后使用石蜡切片机进行切片,厚度在4-8um左右。将切完后的组织切片放入载玻片上使用40℃温水浸泡使组织充分伸展。组织样本脱蜡:将待测组织样本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更换二甲苯继续浸泡10min,目的是使用二甲苯将切片中的石蜡溶解,这样可以在进行染液染色的时候,染液可以充分进入组织种,同时,二甲苯还可以起到透明的作用,使切片更容易观察。西藏推荐的HE染色哪家好