不同品种或同一品种不同品系动物对EAE模型的易感性主要受免疫反应基因(Ir基因)影响,Ir基因的调节作用表现为T细胞表面受体对髓鞘碱性蛋白(MBP)的特异性表达。动物的种类不同,其受体表达能力不同,对自身抗原的反应性不同,因而对EAE的易感性也不同,因此在选择动物时需要寻找EAE模型的敏感动物。鉴于对EAE模型敏感的Lewis、DA大鼠,PL/J,SJL/J小鼠的价格更加昂贵、不宜获得且难以饲养,国内多采用价廉易得的Wistar大鼠,但其敏感性不及前者。MS的每个方面都需要在EAE模型中进行单独研究,增加了数据分析的难度。贵州专业的eae模型实验外包
从鸟类到哺乳类的多种动物如鸡、小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、羊、犬、猴等均可成功诱发EAE,但不同种属或同一种属不同品系动物的敏感性有很大差异。对EAE敏感的动物有Lewis、DA大鼠,PL/J、SJL/J小鼠,Hartley、Strain13豚鼠。虽然豚鼠对诱发EAE相当敏感,但其品系复杂,有关试剂缺乏,一般不常用作实验对象。相比之下大鼠及小鼠的背景知识及相关试剂则较为普遍,遗传学、免疫学等方面的研究也较深入,且其EAE在临床、病理、免疫及生化改变等方面都与人类脱髓鞘疾病较为相似,因此应用比较为普遍。河北专门做eae模型有哪家MOG是目前常用建立EAE模型的髓鞘抗原,多以诱发慢性EAE(Chronic EAE)模型。
EAE模型的发展与年龄密切相关。幼龄动物发病后症状很快达到高峰,随后又迅速恢复,和成年动物相比病程较短,其抗原注射部位及CNS内的炎性细胞浸润程度较轻,并且幼龄动物体重偏小,一般情况差,易出现麻醉意外而死亡。若动物体重(周龄)偏大,则发病延迟,且症状较重,所以选择受试动物以青年期为佳。但若作为抗原提供者,其年龄可适当放宽,一般大于4周即可。MS多为青年女性,EAE的发生也存在性别差异。一般来讲,雌性动物较雄性敏感,表现在雌性动物的发病率高,临床症状相对严重,如Wistar大鼠及SJL/J小鼠,但也有的动物如Lewis大鼠,雄性较雌性敏感。另外实验时间选择在夏季比冬春季节诱导动物模型的敏感性更高。敏感性高的动物,有时症状较严重且死亡率高,应引起注意。
多发性硬化(Multiple sclerosis,MS)是一种病因不明的主要累及***系统蛋白质的慢性炎性脱髓鞘疾病。其病理特征是血管周围炎***变,髓鞘破坏,星型细胞增值,少突胶质细胞和轴索缺失。实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephakmyelitis EAE)是目前国际公认的研究MS的动物模型,比较常用的致敏原多为脑或脊髓组织匀浆、髓鞘蛋白成分或其多肽片段等。由于髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(Myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG)存在于髓鞘和少突胶质细胞的比较外层,具有高度免疫原性,MOG和抗MOG抗体在MS的发病过程中起重要作用,用MOG诱导的EAE可以作为研究MS的理想模型。小鼠是EAE研究中常见的物种,主要是因为它们具有成本低、研究方案成熟和具有繁殖转基因品系的特点。
通常不同品种动物对同一抗原的敏感性不同、不同抗原的抗原性也不同,并且不同来源的同一抗原的活性也有明显差异。一般情况下,抗原性强弱依次为豚鼠脊髓>大鼠脊髓>牛脊髓,脊髓组织>脑组织,豚鼠MBP>牛MBP。蛋白或多肽单体不但结构明确,而且可以精确定量,因此利于进行EAE发病机制研究,但不易获得。脊髓匀浆和脑组织匀浆两种抗原均含有多种抗原表位,且易于获得,适用于多种动物,但其成分复杂,不易精确定量,这给某些特殊研究造成不便。诱导鼠类产生EAE模型的异种抗原,以新鲜豚鼠脊髓制备的抗原佐剂乳化物为比较好。在一定范围内抗原的量和EAE的发病率及发病程度有相关性,注射抗原佐剂乳化物的剂量越大,EAE的发病率越高。抗原的剂量可因动物的品系、抗原种类、免疫方法、研究目的等的不同而有很大变化。另外,抗原的物理状态也很重要,高分散度的抗原易于被吞噬和递呈,进而较高效率地***免疫系统。EAE小鼠模型如何制备?河北专门做eae模型有哪家
EAE动物模型已经证实了髓鞘蛋白特异性CD4+T细胞、CD8+T细胞和Th17细胞的致脑炎作用。贵州专业的eae模型实验外包
实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)是一种以特异性致敏的CD4+T细胞介导为主的,以***系统内小血管周围出现单个核细胞浸润及髓鞘脱失为特征的自身免疫性疾病,是人类多发性硬化(MS)的理想动物模型,在临床神经免疫学的研究中具有重要意义。抗原佐剂为非特异性免疫增强剂,它可改变抗原的物理性状,延长抗原在体内的储留时间,刺激抗原提呈细胞及淋巴细胞,从而增强和扩大免疫应答效果,它还能引起迟发性血脑屏障通透性增加和自身免疫反应。贵州专业的eae模型实验外包