TTC染色如何测定脑梗MCAO面积-TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是呼吸链中吡啶—核苷结构酶系统的质子受体,与正常组织中的脱氢酶反应而呈红色,而缺血组织内脱氢酶活性下降,不能反应,故不会产生变化呈苍白。将模型动物大鼠安乐死,解剖取材完整的脑组织,在-20℃速冻20min,便于切片。切片切成6片,每隔2mm切一片。将切片至于2%TTC磷酸缓冲液(PH 7.4)溶液中,用锡箔纸盖住培养皿,放入37℃温箱30min,15min后翻动脑切片,使其均匀接触到染液。实验外包团队具有丰富的实验操作经验。他们经多年的实践积累,对实验操作过程中的环节有着深入的了解掌握。定制脑梗MCAO模型造模方法
造模方法 颈部备皮常规消毒,取颈正中切口剪开皮肤,分离皮肤下软组织并暴露颈动脉鞘; 游离出颈总动脉1.5cm,穿线备用; 向远心端找到颈外侧动脉,游离涌现结扎,提起颈总备用线,在近心端,远心端用动脉夹夹住; 在近心端动脉夹处,用5mL注射器针头刺破血管,稍微提起动脉夹,用镊子夹住线栓,从小口插入动脉后,去掉远心端动脉夹,然后用镊子夹住线栓,线栓插入到颈内距分叉处1.8-2.0cm; 用备用线将颈总和线栓一起结扎住,*好是结扎双道,记录线栓插入时间,在将动脉夹另一边近心端颈总结扎住,去掉动脉夹; 注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。 线栓法是国内外*常用的制作脑局部缺血再灌注损伤的方法。Koizumi 于 1986 年首先报道了用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,此后 Longa等对该方法进行了改良。线栓法脑缺血模型的研究已经取得很多突破和进展,但模型制备的稳定性受很多因素的影响,如小鼠体质量、线栓的选择等。小鼠缺血再灌注损伤后脑梗死体积百分比的变化可以为研究治*脑卒中药物时间窗提供基础依据,对进一步深入研究大鼠缺血再灌注损伤模型有重要的意义。南京脑局部缺血再灌注损伤脑梗MCAO模型研究方案这种模型有助于研究脑梗的发病机制,并寻找新的治*策略。
脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中,占脑卒中总数的 60% ~ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因,但研究发现,缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。 通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法,此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助,缺血部位较恒定,能够准确控制缺血及再灌注时间,容易控制局部条件,全身影响小,是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。
通过神经功能缺损评分,研究人员可以定量地评估脑梗死后对动物神经功能的影响。这对于研究脑梗死的病理过程、治*方法以及药物效果具有重要的意义。同时,这种评分方法也可以为临床医生提供参考,帮助他们更好地评估患者的神经功能缺损程度。 需要注意的是,神经功能缺损评分只是一种评估方法,不能完全戴*动物的神经功能状态。因此,在实验中还需要结合其他指标和方法进行综合评估。此外,由于实验动物的个体差异和环境因素的影响,实验结果也可能存在一定的误差。因此,在进行实验研究时需要严格控制实验条件和操作过程,以保证实验结果的准确性和可靠性。在实验过程中,应建立严格的质量控制体系,包括实验操作规范、数据记录和分析等环节。
SD大鼠MCAO模型作为世界上*通用的模型之一,在其制作时为了达成较高的成功率也需要不断的探索和努力,我们再次总结了难点和问题点,希望这篇文章可以为大家制备模型提供参考。 (1)麻醉时间,麻醉程度适中,过浅影响操作,过深导致死亡。 (2)血管分离,在分离右侧CCA、ECA、ICA时,要注意迷走神经的保护, 减少对迷走神经的损伤, 尽量避免对迷走神经的直接牵拉。 (3)术中状态监护,例如发现呼吸异常,用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧,防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。 (4)手术视野,可以制备金属勾,用橡皮筋缠绕连结金属钩固定在固定板上,从而使手术切口左右上下拉开,扩大手术视野。手术有一定技术难度,血管结扎不紧或结扎线脱落,会出血导致病理生理状态改变或增加死亡。定制脑梗MCAO模型造模方法
将实验外包可以节省了大量时间,构建脑梗MCAO模型,来艾菱菲生物定制模型。定制脑梗MCAO模型造模方法
缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。由于小鼠的脑血管解剖特点与人类较为相似,故小鼠广泛应用于缺血性脑梗死的研究当中。缺血性脑梗死除了会影响缺血的区域之外,还会影响相关的神经甚至整个中*神经系统。因此小鼠缺血性脑梗模型有助于研究神经连接和大脑整体的改变。这有助于推动缺血性脑卒中等脑科学的进步。 进一步研究小鼠缺血性脑梗死模型,科学家们可以深入了解脑梗死的发病机制、病理生理过程以及神经功能损害。通过不断优化实验方法和技术,研究人员可以更精确地模拟人类缺血性脑梗死的临床表现,为临床治*提供有力的实验依据。定制脑梗MCAO模型造模方法