南京蛋白免疫沉淀磁珠现货「上海世途科生物科技供应」

免疫沉淀基本参数

品牌
世途科生物
产品名称
免疫沉淀磁珠Protein A/G
有效期
12个月

免疫沉淀企业商机

免疫沉淀技术的实验设计通常包括以下几个关键步骤：

1. 目标蛋白质的选择：

2. 抗体的选择：选择特异性强、亲和力高的抗体来捕获目标蛋白质

3. 样本的准备：收集和准备细胞或组织样本。

4. 蛋白质的裂解和释放：选择合适的裂解条件，如pH值、离子强度、去污剂等。

5. 蛋白质浓度的测定：确定裂解液中蛋白质的浓度，以便于后续步骤的标准化。

6. 免疫沉淀的操作：将特异性抗体与裂解液混合，并在适宜的条件下孵育，以形成抗体-抗原复合物。

7. 非特异性结合的减少：通过预纯化步骤去除可能的非特异性结合蛋白。

8. 洗涤：多次洗涤以去除未结合的蛋白质和杂质。

9. 目标蛋白质的洗脱：使用适当的缓冲液洗脱抗体-抗原复合物。

10. 后续分析：对洗脱的蛋白质进行进一步分析，如Western Blot.

11. 对照实验：设计适当的正对照和负对照，以评估实验的特异性和敏感性。

免疫沉淀技术Co-IP的实验方法。南京蛋白免疫沉淀磁珠现货

免疫沉淀技术RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）的实验方法基于以下几个关键步骤：

1. 细胞裂解：首先，细胞或组织样本被裂解，以释放细胞内的蛋白质和RNA复合物。

2.抗体特异性结合：裂解后的样本中加入针对特定RNA结合蛋白的抗体。这些抗体能够特异性地识别并结合到目标蛋白。

3. 免疫复合物形成：抗体与目标蛋白结合后，形成抗体-蛋白质-RNA复合物。

4. 亲和介质捕获：使用蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）来捕获这些抗体-蛋白质-RNA复合物。蛋白A或蛋白G能够与抗体的Fc部分结合，从而拉下与之结合的复合物。

5. 洗涤：捕获的复合物被洗涤以去除未特异性结合的蛋白质和RNA。

6. RNA分离和分析：从珠子上洗脱或消化复合物，分离出RNA，并进行进一步的分析，如qPCR、Northern blot或高通量测序（RNA-Seq）。

南京蛋白免疫沉淀磁珠现货免疫沉淀技术的应用。

ChIP（染色质免疫沉淀）实验是一种强大的技术，用于研究蛋白质与DNA之间的相互作用，尤其是在转录调控、DNA修复、复制以及表观遗传学领域。然而，像所有实验技术一样，ChIP实验也有其优点和缺点。

ChIP实验的优点：

1. 体内反应的反映：ChIP提供了一种在体内研究蛋白质与DNA相互作用的方法，能够真实、完整地反映结合在DNA序列上的靶蛋白的调控信息。

2. 全基因组覆盖：ChIP技术可以覆盖整个基因组，提供关于蛋白质-DNA相互作用的视图。

3. 适用于多种蛋白质：ChIP可以用来研究组蛋白修饰、转录因子以及其他DNA结合蛋白。

ChIP实验的缺点：

1. 实验步骤繁琐。

2. 需要大量起始材料：ChIP实验通常需要大量的细胞或组织作为起始材料。

3. 交联的影响：使用交联剂可能会改变蛋白质的结构，从而影响抗体的识别和蛋白质-DNA的相互作用。

4. 染色质碎裂的分辨率：染色质碎裂的效率和分辨率直接影响ChIP的准确性，需要优化以获得结果。

5. 抗体质量：抗体的质量对实验结果至关重要，但高质量、特异性强的抗体可能难以获得或成本较高。

免疫沉淀ChIP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。

琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。

与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。

简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。

免疫沉淀样本的制备。

Co-IP（Co-Immunoprecipitation，共免疫沉淀）的实验方法通常包括以下步骤：

1. 细胞培养与裂解：细胞在适宜的培养条件下生长到适当的密度。

蛋白质分离：裂解后的细胞混合物通过离心去除未破碎的细胞碎片和未裂解的细胞。收集上清液

2. 抗体的添加：将特异性抗体（针对目标蛋白质的抗体）加入到裂解物中。

3. 免疫复合物的形成：抗体与目标蛋白结合后，形成免疫复合物。

4. 亲和介质的使用：向混合物中添加蛋白A或蛋白G结合的珠子（如琼脂糖或磁性珠子）。

5. 免疫复合物的捕获：将混合物与珠子孵育一段时间后，使用磁铁或离心的方法将珠子收集起来，同时捕获了与之结合的免疫复合物。

6. 洗涤：洗涤珠子以去除未特异性结合的蛋白质和其他分子。

7. 洗脱：使用适当的缓冲液将免疫复合物从珠子上洗脱下来，常用的缓冲液包括SDS样品缓冲液，用于后续的电泳分析。

8. 蛋白质分析：洗脱的蛋白质可以通过SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot、质谱分析等方法进行进一步分析。

9. 实验对照：实验中应包括阳性对照和阴性对照，以确保实验结果的可靠性。

10. 数据分析：对实验结果进行分析，确认目标蛋白是否成功沉淀，并鉴定任何可能的相互作用蛋白。

免疫沉淀RIP抗体的选择？广州蛋白免疫沉淀外包公司

免疫沉淀技术IP的实验设计。南京蛋白免疫沉淀磁珠现货

免疫沉淀Co-IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。

琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。

与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。

简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。

南京蛋白免疫沉淀磁珠现货

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温州蛋白免疫沉淀外包公司 2024-12-24

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