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杭州Co IP免疫沉淀磁珠的选择

免疫沉淀技术RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）是一种用于研究细胞内RNA与蛋白...

免疫沉淀基本参数

品牌
世途科生物
产品名称
免疫沉淀磁珠Protein A/G
有效期
12个月

免疫沉淀企业商机

免疫沉淀技术RIP（RNA Immunoprecipitation，RNA免疫沉淀）是一种用于研究细胞内RNA与蛋白质相互作用的技术。RIP技术可以帮助我们了解转录后调控网络的动态过程，并发现miRNA等非编码RNA的调节靶点。

RIP技术的原理是利用针对特定RNA结合蛋白的抗体，将细胞内的RNA-蛋白质复合物沉淀下来。然后，可以通过分离纯化，对这些复合物中的RNA进行检测，如qPCR验证或测序分析。

表观遗传学和RNA生物学领域对不同RNA作用和功能的关注增加。RNA-蛋白质相互作用能够调控mRNA和非编码RNA的功能。对RNA潜能的这一新认识带动了新方法的发展，使研究人员能够定位 RNA-蛋白质相互作用。

免疫沉淀技术的实验设计。杭州Co IP免疫沉淀磁珠的选择

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）的实验步骤通常包括以下几个关键环节：

1. 细胞裂解：首先需要收集细胞并裂解它们，以释放细胞内的蛋白质。这通常通过添加含有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液来完成，以防止蛋白质降解。

2. 裂解物上清：裂解后的细胞混合物通常需要通过离心来去除未破碎的细胞碎片和未裂解的细胞，从而获得上清。

3. 抗体的添加：将特定于目标蛋白的抗体加入到裂解物中。这些抗体将特异性地结合到目标蛋白上。

4. 免疫复合物的形成：抗体与目标蛋白结合形成免疫复合物。

5. 免疫复合物的捕获：使用Protein A/G结合的磁珠来捕获免疫复合物。

6. 洗涤：捕获免疫复合物后，需要用裂解/洗涤缓冲液多次洗涤，以去除未结合的蛋白质和其他污染物。

7. 洗脱：免疫复合物可以通过加入SDS样品缓冲液进行洗脱，这将导致抗体和抗原变性并从珠子上释放下来，或者使用低pH缓冲液进行温和洗脱，以保持蛋白质的天然构象。

8. 分析：洗脱后的样品可以通过SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot等方法进行分析，以验证目标蛋白的存在和状态。

南京免疫沉淀实验视频免疫沉淀技术的应用。

免疫沉淀技术（Immunoprecipitation, IP）在生物医学研究中有着广泛的应用，以下是一些主要的应用领域：

1. 蛋白质相互作用研究：IP技术可以用来研究蛋白质之间的相互作用，揭示蛋白质复合物的组成和蛋白质之间的相互作用网络。

2. 信号转导研究：通过IP技术，可以富集信号转导通路中的关键蛋白质，研究信号转导的机制和调控[。

3. 蛋白质修饰研究：IP技术可以用于富集经过特定修饰的蛋白质，例如磷酸化、乙酰化等，进而研究蛋白质修饰的功能和调控。

4. 药物靶点筛选：IP技术可以用于富集药物靶点蛋白质，帮助筛选潜在的药物靶点。

5. 疾病机制研究：通过分析疾病相关蛋白质的相互作用，IP技术有助于揭示疾病的分子机制，为理解疾病的发展过程和寻找靶点提供重要信息。

6. 药物相互作用分析：IP技术可以用于分析药物与蛋白质的相互作用，为药物作用机制研究提供重要信息。

7. 生物标志物发现：IP技术可以用于鉴定与疾病状态相关的蛋白质相互作用，筛选出潜在的生物标志物，用于疾病的诊断和预后评估。

“免疫沉淀”一般是指采用固定在固相支持物上的结合蛋白，进行小规模的蛋白质亲和纯化的实验。更确切地说，IP是采用固定在微珠支持物(一般是琼脂糖树脂)上的特定抗体，从复杂的混合物中，纯化单一抗原的实验。固定化蛋白质复合物的组装既可以分步进行，也可以一步完成。

常见的加样顺序：抗体和样本(如细胞裂解物)一起孵育，然后加入亲和微珠，用于捕获抗体-抗原复合物。也可以将抗体和微珠(通过抗体结合蛋白，如蛋白A、G或A/G等，直接或间接结合抗体)先进行孵育，然后再加入含有抗原的样本。当抗原、抗体和固相支持物产生结合以后，充分洗涤微珠，再采用适当的洗脱缓冲液从支持物上洗脱抗原。

免疫沉淀技术IP的原理是什么？

免疫沉淀Co-IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。

琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ，它能够直接高效、快速结合抗体，而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构，这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触，具有更高的结合载量。

与琼脂糖珠不同，磁珠是固体，抗体的结合限于磁珠的表面。磁珠 (直径 1-4 μm) 明显小于琼脂糖珠，尽管磁珠没有多孔中心增加结合能力，但每体积的磁珠数量比琼脂糖珠多，使磁珠拥有足够的抗体结合表面积满足高容量的抗体结合。

简而言之，琼脂糖珠的结合能力较强，而磁珠在得率，可重复性以及自动化方面有明显的优势。

免疫沉淀技术IP是什么？南京免疫沉淀实验视频

免疫沉淀技术Co-IP的原理是什么？杭州Co IP免疫沉淀磁珠的选择

免疫沉淀实验不同于WB实验的样品制备，对实验样品制备要求更高，除了要控制所有操作尽量在冰上完成外，关键的是裂解液的成分，裂解液成分直接决定了样品质量。

主要影响：

1. 蛋白的释放：许多目的蛋白定位在细胞器，质膜，细胞核，细胞骨架中，但通常这些亚细胞结构很难被裂解液有效溶解，所以很难将这些蛋白释放出来。

2. 蛋白相互作用：不同去垢剂对不同性质的蛋白质间相互作用影响程度不同，一些互作较弱的蛋白对尽管在比较温和的裂解液配方中仍然会被破坏。

杭州Co IP免疫沉淀磁珠的选择

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