同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程:1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞,释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质,去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长,成本较高,步骤繁多,增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法,满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素:本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本,且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系,在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA,从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单,成本低廉,检测灵敏,且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子取样前要准备一杯清水,饮入约50ml清水充分洗漱口腔约10秒,吐掉;重复两三遍。上海可定制口腔拭子厂家
相对湿度40%~90%的无腐蚀性气体、通风良好、阴凉干燥、清洁的环境中。CY-96000型鼻腔采样拭子:供医疗机构采集患者鼻腔内***的***及DNA样本。***采样拭子:用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道及肠道***的鼻部及咽喉部采样。产品组成:⑴尼龙植绒拭子。(用于采样,释放量高达90%以上)三、产品特点:①采用国际通用的方便***的纸塑包装。②γ射线***,确保无菌。③大包装盒内的每套独立包装,方便使用。④针对不同的标本类型选用了不同的保存液。采样管(细菌、***、支原体、衣原体)产品优势:1、采集拭子特点:采集系统采用尼龙植绒拭子,对微生物***害,能很大程度的增加标本的采集及释放量。大量临床实验表明:与普通无菌棉拭子相比,尼龙植绒拭子有着更好的对临床微生物标本的采集与运送效果.尤其是对于那些不能及时送检、放置时间过长的标本而言更是如此。拭子的优势:①独有的喷射式植入尼龙纤维技术,增加标本的采集及释放量。②拭子全长,塑料杆上有独特的可折断设计。③绒毛质地可采集更多目标分析物。④没有标本残量,加快标本过程处理。⑤拭子为***独立包装。山东口腔拭子厂家.兼容性超广:能与市面上大多数荧光检测仪兼容,并提供能替代进口品牌的检测棒,无需调整现有的限值。
加入20μteinaseK溶液,混匀。加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,在56℃放置14min(期间颠倒混合样品数次),溶液应变清亮,若未完全变清亮,延长裂解时间至完全变清亮。加人200μL无水乙醇,充分振荡混匀10s,此时可能会出现絮状沉淀。将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12,000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入500μLGD(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。向吸附柱中加入600μLPW(已加入无水乙醇),12,000rpm离心30s,弃废液,将吸附柱CB3放回收集管中。12,000rpm(~13,400×g)离心2min。将吸附柱放置新的,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。向吸附柱中悬空滴加50~200μL洗脱缓冲液,室温放置2~5分钟,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将溶液收集到离心管中,测定浓度及纯度后,取3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。用本发明和对照产品对8份样本同时进行荧光PCR扩增。结果如图6,本发明所有反应孔背景信号好、Ct值都在21~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型。
工艺说明:一次性医用耗材呼吸道***采样拭子试剂这种垂直固定方法源于植绒工艺,即把拭子置于静电场中,将纤维喷涂于拭子前列。这种工艺能实现具有开放式结构,且吸水性超高的薄层。不同于以往类似褥垫或软垫的传统缠绕拭子,尼龙植绒拭子没有会分散和圈闭样本的内部吸附核,而是使样本紧贴表面,从而能够快速完全地洗脱。产品描述:植绒拭子是由尼龙短纤维绒毛头和医用级ABS塑料杆构成。尼龙短纤维的作用就像一把柔软的刷子,能有效改善对细胞材料的采集;纤维间的毛细管运动形成强大的液压,由此摄取液体样本;同时样本紧贴拭子表面,易于洗脱。产品用途:采样尼龙植绒拭子用途***,在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测,以及法医鉴定时都十分理想。也可用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道***的咽喉部采样。产品特点:1.采用**的尼龙植绒技术,样本吸收更加快速2.新颖的折点设计,让拭子轻松折断并进入管中,更加便于操作3.限度的样本洗脱及转移,对微量DNA样本采集尤为出色4.经过***剂的特殊处理,防止微生物污染,封闭式包装,无菌、无酶、无***剂。口腔拭子是一个形状长得跟牙刷很像的拭子。
靠实力铸品牌,以质优占市场,以诚信闯天下。不仅拥有完善的加工制造及检测设备,而且对原材料、热处理、装配、检测与试验、标识与包装等进行严格地**问效,以确保向用户提供满意、合格的产品尤其广为推崇的华晨阳医疗项目,一贯视创新为企业生存和发展的动力源泉;拥有一支经验丰富,承担着多项科技项目计划的专业研发团队。研发方向延伸到与产品相关联学科的基础研究以及建立在充分基础研究之上的技术和产品开发研究,并与境内外多家高校及医疗机构保持紧密合作,取得了可喜的成果。截至目前,华晨阳医疗现拥有18项**重点专有技术、15件专利申请,其中3项**已被国家授权。华晨阳公司,始终以前列的产品质量,完善的质保和用户服务体系,赢得了来自全国和世界各地客户的***赞誉。本公司生产的各种产品不仅在国内受到青睐,而且远销欧美、澳大利亚等120多个国家和地区。时代在前进,科技在发展。华晨阳公司坚持以“客户至上,以人为本”为宗旨,以“提供质量产品及诚信服务,使用户真正满意”为目标,继续努力创新,与时俱进,开拓企业更加辉煌的前景。热诚欢迎国内外用户和我们建立长期友好的合作关系。 口腔拭子只能使用一次。广西样本口腔拭子源头厂家
口腔拭子是海绵口腔拭子。上海可定制口腔拭子厂家
所有反应孔背景信号好、Ct值都在19~25之间,荧光扩增曲线呈典型的S型,说明本发明实例1提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法具有较好的可行性。将四份不同来源不同的人血液样本进行荧光PCR扩增检测,每份样本平行三次,结果分别如图2、图3、图4、图5所示,由图可见,每个样本的平行实验,其曲线的Ct值很接近且≤25。说明本发明实例提供的血液样本快速提取法用于荧光PCR扩增的方法有可靠的重复性以及较好的均一性。实施例2与市场现有的血液基因组提取试剂盒产品对比。本发明的具体步骤如下:将**管颠倒混匀后,吸取100μL血液至,加入200μL的核酸释放剂(20mM~80mM的氢氧化钠溶液、~、~、~、~***钠、~3%甲酰胺),涡旋混匀,然后5000g离心30s,弃上清,获得细胞沉淀;然后再加入200μL核酸释放剂,涡旋1min至沉淀完全散开,5000g离心30s,弃上清;向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂,涡旋振荡1min,室温放置5min,12000g离心30s,取上清液即为提取的血液基因组DNA;取上清液3μL,加入到配制好的荧光PCR反应液,于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。选用某公司的血液基因组提取试剂盒作为方法比对,具体操作过程:将取血管颠倒混匀数次,吸取200μL血液于。上海可定制口腔拭子厂家
深圳市华晨阳科技有限公司是一家集基因检测、分子诊断、干细胞研发生产销售于一体的国家高新技术企业。公司拥有20多项**,部分专利已经转化应用于市场。公司于2016在深圳沙井恒昌荣高新产业园建立新的GMP厂房及研发实验室。产品主要应用于基因检测、医院、医疗机构、生物制药、出入境检验检疫、诊断试剂、公安刑侦法医等。近年来,公司不断加大自主研发投入,积极引进人才和技术,并与国内外多家科研院所以及医院有着紧密合作,促进产学研成果转化。
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