说PCR仪(尤其是实时荧光PCR仪)是动物诊断工具的中流砥柱毫不为过。然而,即时、快速和准确的检测是广大兽医站和养殖场对检测仪器更高的诉求。面对传染性疾病,用户对便携、易操作、准确性高、成本相对低廉的检测设备需求更为迫切。事实上,以微流控芯片作为耗材,搭配后端定量PCR的检测在临床检测领域已有成型产品——即巧亦捷全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机。它实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,样本进,结果出,检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,特别适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用
绝大多数PCR检测的操作分为:样本采集→样本处理→核酸提取→上机检测四个步骤,在样本的存放和处理,特别是核酸的提取和扩增过程中,很容易造成PCR实验室的污染,从而造成结果假阳。巧亦捷核酸检测一体机全自动核酸提取,手工操作时间极短:将样本置于薄膜囊袋中进行核酸的释放和扩增,一步直达,短时间出结果。既减少了核酸提取的工作量,缩短了检测时间,又极大降低了污染发生的几率。**小化人为干预带来的操作误差,降低污染的可能性。是市面上自动化程度比较高的多重病原体解决方案。全自动PCR分析仪PCR技术可以为动物健康和生命科学研究提供更加强大的工具和技术支持。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。
巧亦捷核酸一体机采用的TaqMan探针法介绍:TaqMan探针法是具有高度特异性的定量PCR技术。它的工作原理是在PCR反应体系中存在一对PCR引物和一条探针,探针的5′端标记有报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团,探针只与模板特异结合,其结合位点在两条引物之间。当探针完整的时候,报告基团的荧光能量被淬灭基团吸收,所以仪器搜集不到信号,随着反应的进展,Taq酶遇到探针,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探针切断,导致报告基团的荧光能量不能被淬灭基团吸收,产生了荧光信号,因此信号的强度就代、表了模板DNA的拷贝数。PCR技术是一种用于扩增特定DNA、片段的分子生物学技术。
巧亦捷(ingeNova)是翊新诊断技术(苏州)有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌,以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测,非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测,牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测,人畜共患病核酸检测,以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台,巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。无论是猪瘟、蓝耳、牛鼻支、牛腹泻等畜禽类传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行准确诊断。江苏宠物PCR核酸检测
对于宠物的诊断,巧亦捷薄膜微流控全自动核酸检测平台是非常有用的工具。。动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用
在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。两者的区别:胶体金是针对病毒蛋白质的检测,PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的,因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增,因此当样本中病毒量少的情况下,就有可能无法找到病毒;而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增,所以PCR检测的灵敏度就更高,更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上,胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性;但如果样本病毒量低于10万,则只能依靠PCR技术。动物疫病PCR技术在动物疫病检测的应用