本发明涉及一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。背景技术：近年来，随着荧光PCR技术的不断成熟。该技术在科研及检验领域得到了应用，成为分子生物学领域不可或缺的一项重要技术。在进行遗传背景分析过程中，血液、唾液和口腔拭子成为重要的生物分析样本。但是，由于血液、唾液和口腔拭子中存在有很多PCR反应物，例如血液中含有血红素，蛋白质，脂肪，抗凝剂等，唾液和口腔拭子含有蛋白质，脂肪，抗凝剂等，使得用血液、唾液和口腔拭子直接进行荧光PCR反应变得尤为困难。因此，现在临床上往往先要从血液、唾液和口腔拭子样本中纯化出DNA，才能进行样本的DNA扩增。提取血液、唾液和口腔拭子基因组的方法种类非常多，传统酚氯仿抽提法，高盐盐析法，模离心柱吸附法，磁珠法，等等。经典的血液核酸提取方法包括几个过程。1.通过低渗液涨破红细胞，将血红素物质释放出来，然后离心，清洗去除血红素。2.通过裂解液裂解白细胞，释放核酸物质。3.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。4.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。5.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。 口腔拭子一旦有破损记得联系经销商或者厂商，及时沟通退换。北京咽拭子口腔拭子全国发货
口腔拭子DNA提取介绍所述iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒允许从人口腔拭子的基因组DNA的快速和有效的纯化。
DNA样本准备裂解液后，您可以在使用iCleanhcy不到15分钟纯化DNA技术。根据所使用的DNA纯化试剂盒，可以使用液体处理机器人单独或在自动化系统中处理样品。对于套件预期用途的iCleanhcy设计DNA口腔细胞试剂盒以允许从人颊细胞拭子或来自漱口水/或者唾液采集器手机人体唾液的沉淀细胞中分离以下量的基因组DNA。在加工前，样品可以在4°C下储存长达2周，而DNA产量或质量没有明显损失，不会降解。纯化的基因组DNA适用于下游应用，例如PCR,芯片.iCleanhcy?的DNA归口腔细胞培养基：在150微升的总体积在1-3毫微克/微升的浓度制作的基因组DNA的归一化产率。
iCleanhcy的DNA口腔细胞培养基：纯化的基因组DNA的6微克。重要提示：DNA产量各不相同，取决于几个因素，包括服用拭子的人的技术，供体是高还是低的脱落剂，以及使用的拭子类型。优点使用iCleanhcy的DNA口腔细胞的试剂盒，分离基因组DNA提供了以下优点：使用基于磁珠的技术分离基因组DNA，无需使用危险化学品，离心或真空歧管在样品制备和裂解后不到15分钟内。 黑龙江正规口腔拭子批发口腔拭子没有标本残量，可以加快标本过程处理。
工艺说明：一次性医用耗材呼吸道***采样拭子试剂这种垂直固定方法源于植绒工艺，即把拭子置于静电场中，将纤维喷涂于拭子前列。这种工艺能实现具有开放式结构，且吸水性超高的薄层。不同于以往类似褥垫或软垫的传统缠绕拭子，尼龙植绒拭子没有会分散和圈闭样本的内部吸附核，而是使样本紧贴表面，从而能够快速完全地洗脱。产品描述：植绒拭子是由尼龙短纤维绒毛头和医用级ABS塑料杆构成。尼龙短纤维的作用就像一把柔软的刷子，能有效改善对细胞材料的采集；纤维间的毛细管运动形成强大的液压，由此摄取液体样本；同时样本紧贴拭子表面，易于洗脱。产品用途：采样尼龙植绒拭子用途***，在用于细菌学样本处理、***学细胞培养、DFA检验、快速直接的检验、酶免疫法检测、聚合酶链反应和基于分子诊断的检测，以及法医鉴定时都十分理想。也可用于流感、猪流感、禽流感、手足口等呼吸道***的咽喉部采样。产品特点：1.采用**的尼龙植绒技术，样本吸收更加快速2.新颖的折点设计，让拭子轻松折断并进入管中，更加便于操作3.限度的样本洗脱及转移，对微量DNA样本采集尤为出色4.经过***剂的特殊处理，防止微生物污染，封闭式包装，无菌、无酶、无***剂。
下面将结合实施例对本发明作进一步说明。实施例1一种可用于荧光PCR扩增的快速提取全血基因组的方法中的荧光PCR扩增反应液包括浓度或含量和组分如表1。将所述的荧光PCR扩增反应液对血液样本中的管家基因***DH进行荧光PCR扩增，方法如下：将**管颠倒混匀后，吸取100μL血液至，加入200μL的核酸释放剂，涡旋混匀，然后5000g离心30s，弃上清，获得细胞沉淀；然后再加入200μL核酸释放剂，涡旋1min至沉淀完全散开，5000g离心30s，弃上清；向细胞沉淀中加入50μL核酸释放剂，涡旋振荡1min，室温放置5min，12000g离心30s，取上清液即为提取的血液基因组DNA；取上清液3μL，加入到配制好的荧光PCR反应液，于ABI7500荧光PCR仪中进行扩增。所述的荧光PCR扩增程序如下。步骤①：50℃，2min，循环1次。步骤②：95℃，5min，循环1次。步骤③：95℃15s，55℃30s（收集荧光），循环40次。结果分析：平行扩增的荧光定量PCR反应中，阴性对照无扩增，说明反应体系正常，无污染。用本发明处理了10份来源不同的人血液样本，然后用人管家基因***DH引物进行荧光PCR扩增检测，结果如图1所示。 口腔拭子（口腔脱落细胞）取样是简单、无痛、无创的DNA标本采集方法。
同样唾液和口腔拭子中核酸提取方法与血液的提取方法相似包括以下4个过程：1.通过裂解液裂解口腔脱落细胞，释放核酸物质。2.通过离心柱或纳米磁珠特异性吸附核酸物质，去除其他杂质。3.通过漂洗液洗掉挂在离心柱或纳米磁珠表面的化学试剂残留和蛋白残留。4.加入洗脱液将核酸从离心柱或纳米磁珠上洗脱下来。传统的提取方法由于核酸提取纯化过程耗时长，成本较高，步骤繁多，增加了基因污染的风险。因此需要一种血液、唾液和口腔拭子样本经过简单处理就可以作为模板进行荧光PCR扩增检测方法，满足科研和医学领域快速检测的要求。技术实现要素：本发明提供了一种快速提取血液和口腔拭子基因组DNA的方法。该发明通过快速简单处理口腔拭子和血液样本，且无需纯化可直接用于荧光PCR扩增的DNA。10分钟内即可得到应用于ARMS-PCR反应体系的模板DNA。同时优化ARMS-PCR荧光体系，在反应液中加入防污染UDG酶以及提高Taq酶稳定性的的BSA，从而实现血液和口腔拭子基因组快速荧光PCR扩增检测。该方法快速简单，成本低廉，检测灵敏，且用该方法提取的基因组与商品化试剂盒提取的基因组的检测结果相近。口腔拭子是一个形状长得跟牙刷很像的拭子。湖南医用口腔拭子生产产家
然后将沾有口腔脱落细胞的拭子在洁净通风处、至少一小时直至晾干，装回采集管，完成取样。北京咽拭子口腔拭子全国发货
华晨阳科技有限公司创建于2003年，注册资本550万元。是一家全球性净化产品和洁净产品的专业生产制造厂商。研发并自主生产医疗器械和医疗耗品：如一次性采样拭子、宫颈采样拭子、咽喉采样拭子、鼻腔采样拭子、妇女宫颈采样刷、涂药器、细胞保存液、细胞培养基,液基保存液,皮肤外用涂药器.微生物取样捧,阴道冲洗器.等产品;净化擦拭产品：如用在斑马、美吉卡、爱丽斯打印机上的各种清洁卡，清洁轮、清洁笔、用在液晶显示及数码产品方面的清洁擦拭布，擦拭棒，无尘纸等。其产品***涉及医疗、电子、光学、电脑、数码仪器及日常生活领域。本公司自创建以来，经过十几年净化用品和净化耗材生产制造经验的打拼，已经有了一个睿智、前瞻的经理班子一支力量雄厚的技术骨干，一批团结奋进的员工队伍和一代科学先进的生产设备。经过不断开发、引进国外先进技术结合国内外市场需求，自行研发、设计、生产制造新兴医疗采样拭子、细胞保存液及各种证卡机上配套的清洁卡、清洁笔、清洁轮、各种擦拭棒及无尘擦拭布等几十种产品，通过了ISO9001,ISO14001,ISO13485和CE体系认证。产品通过了欧盟CE认证和实用新型专利证。公司自主研发的产品已出口到120多个国家和地区。本公司以科技求发展。 北京咽拭子口腔拭子全国发货
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