实验动物模型的灌注取材方法:
小鼠灌注灌流
固定小鼠时我一般采用输液器的针头(4号半,这样肉眼可见就是肺部明显充气胀大变白,针头要从心轴方向进针,刺入心尖3~4毫米左右就可以了,开始灌流后剪破右心耳,约40毫升生理盐水,后再灌流约20毫升多聚甲醛,整个灌流固定的过程就完成了。
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大鼠灌注
按大鼠体重,用2%戊巴,比妥钠(0.25ml/100g)进行腹腔注射麻醉,开胸暴露心脏,向左心室内注射1%肝素钠0.2ml后经左心室行主动脉插管,血管钳固定后剪开右心耳,先以生理盐水150ml快速冲洗血管,然后用4%多聚甲醛的0.01mol/LPBS(4℃,PH7.40)250ml灌注固定,先快后慢,共需时间为50min,之后取材,置4%多聚甲醛固定液后固定,在4℃冰箱内保存。多聚甲醛进入大鼠体内,大鼠会出现四肢、尾的抽搐,**终以肝脏发白、内脏鼓起即灌注好。 有推荐的实验动物模型供应商吗?广西大鼠实验动物模型推荐
5XFAD转基因实验动物模型。5XFAD小鼠在小鼠Thy1.2启动子的控制下过度表达人类APP和PSEN1蛋白,共有5个AD连锁突变,分别是APP中的瑞典(K670N/M671L)、佛罗里达(I716V)和伦敦(V717I)突变,以及PSEN1中的M146L和L286V突变。1.5个月大的5XFAD小鼠就开始出现Aβ沉积。5XFAD小鼠在大脑中积累的Aβ42多于Aβ40,这表明5个FAD突变累积影响Aβ42的产生。然而,在5XFAD小鼠中未观察到tau过度磷酸化和NFTs的形成。2个月大时出现星形胶质细胞增生和小胶质细胞增生,表明神经炎症发生在该模型早期。5XFAD小鼠再现了人类AD的病理学,类似于Tg2576、APP23和APPPS1模型。好的实验动物模型构建英瀚斯生物,真实做实验动物模型,可实地参观考察。
阿尔茨海默病的实验动物模型之化学损伤动物模型。主要是以向模型鼠脑部、皮下或腹腔注射特定物质来建立模型,如通过立体定位仪、微透析等方法向实验动物脑内海马、基底核、侧脑室等不同部位注入Aβ 片段,鹅蒿蕈氨酸(IBO)、STZ 等物质。或通过皮下或腹腔注射 D-半乳糖、三氯化铝、冈田酸(OKA)和东莨菪碱(SCOP)等致损物质。
Aβ 诱导模型,Aβ诱导模型是通过在海马CA1区或者侧脑室多次注射Aβ片段诱发Aβ沉积、形成SP为主要病理特点的AD动物模型。Aβ诱导的AD动物模型脑内Aβ沉积明显、Aβ斑块周围星形胶质细胞增生,行为呆滞,易卧,学习记忆能力衰退,出现认知功能障碍、体能衰减明显等AD病理表现。Aβ诱导动物模型,影响因素单一,模型形成时间长,造模过程中,有对脑组织造成穿透性损伤的不确定性,另外,由于注射部位过于集中,使Aβ沉积部位与AD患者Aβ在脑内多区域分布有所不同。
肝切除实验动物模型造模方法:大小鼠的肝叶形状和大小不同。因此,切除每个肺叶需要特别注意其独特的形状和血管位置。左外侧叶很容易切除,因为它有一个狭窄的包含门静脉和肝静脉的蒂,并且不与下腔静脉旁肝相连。然而,如果切除***于切除左侧肝外叶(30%切除模型),则必须在肝左门区分离左侧正中门静脉和伴随的肝动脉。
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由于正中叶在腔静脉周围有一个较宽的半基部,切除该叶需要在距腔静脉3mm的距离处进行几次夹持。单纯结扎肝叶的宽基部切除术有很高的风险导致腔静脉收缩和残端肝组织损伤,因为大量结扎容易导致剩余肝组织变形。由于右上叶位于腔静脉上,基部非常宽,并向背侧延伸至右腔静脉旁肝组织,因此技术上**难切除。切除需要小心地将夹钳放置在离腔静脉3毫米的距离处,并使用4或5条穿刺缝线,以避免损伤残端和腔静脉旁肝组织(图6)。由于约70%的下腔静脉旁组织由右上门静脉的一个分支供应,这种潜在的损伤可能对小的残肝非常重要。 哪家公司实验动物模型成功率比较高?
新一代AD(阿尔兹海默症)实验动物模型。尽管APP-Tg小鼠在过去十几年中范围广的被用于开发新的AD医疗策略,但这种小鼠的基因表型和AD患者的还是不同。而且上述的转基因动物模型在Aβ的生成、tau蛋白的过度磷酸化、神经纤维缠结等病理特征上和AD患者的差异也很大,无法理想地模拟AD患者。为了克服这些不希望出现的问题,研究人员构建了带有Swedish(KM670/671NL)、Beyreuther/Iberian(I716F)和Arctic突变等APP基因敲入(APP-KI)小鼠。APP-KI小鼠在没有过度表达APP的情况下生成Aβ42。随着年龄的增长,APP-KI小鼠大脑皮层和海马区出现过多的Aβ沉积。另一方面,与其他AD模型一样,该模型没有tau病理、NFTs、神经退行性变或大量神经元丢失可用于研究临床前AD。由于基因组编辑的新的进展,尤其是CRISPR/Cas技术,未来对转基因动物模型进行改良也值得期待。转基因实验动物模型哪里有卖?广西大鼠实验动物模型推荐
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急性肺损伤与ARDS实验动物模型。急性肺损伤(ALI)是临床上较为常见的急危重症,是由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性、进行性缺氧性呼吸衰竭。临床上以急性进行性加重的呼吸困难、呼吸窘迫、难治性低氧血症和非心源性肺水肿为早期表现,ALI严重阶段可发展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。目前 ,ALI和ARDS是临床上急危重症医疗的重点、难点。而通过建立ALI和ARDS的动物模型是了解其主要发病机制及探索医疗方法的重要手段,人类研究中产生的假设可以在动物模型中进行测试,同时体外模型得到的实验结果也可以在动物模型中进行评价,也可应用于评估动物与人体疾病之间的联系。广西大鼠实验动物模型推荐