选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。超滤离心管可以用于检测样品中的蛋白质、碳水化合物等有机分子。绍兴小型超滤离心管使用方法
当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。绍兴小型超滤离心管使用方法超滤离心管可用于分离细胞培养上清中的蛋白质和小分子物质。
其实,离心管是离心机中较重要的配件之一,它主要是用来承装实验样品的,我们使用离心机时,首先需要用到的就是转子,转子里面需要放的就是离心管了。之所以说离心管是离心机较重要的配件之一是因为,如果没有离心管,样品就没办法承装。那么,了解过离心管的作用之后,你知道离心管应该如何选择吗?相信连用过离心机的朋友都不会很清楚。那么接下来小编带你了解一下离心管应该如何选择。想要了解离心管如何选择就要先说到材质,离心管的材质一般分为三种,一种是塑料离心管,第二种是玻璃离心管,第三种是钢制离心管。
超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上,较大样本量为15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时,将薄膜面板朝上定位,较大旋转 5000 xg,旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质,在过滤装置的底部插入一个移液管,通过左右扫动的方式将样品抽离,以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明:为达到较佳回收率,离心后应立即取出浓缩样品。使用超滤离心管时应注意避免过度旋转造成样品混乱并影响分离效果。
超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子,一般来说超滤的回收率能够达到90%以上,因此得到许多人的青睐。超滤浓缩器是一种可以为蛋白质样本的浓缩和缓冲交换提供可靠准确结果的一次性超滤离心式过滤装置,与层析、透析等方法相比,超滤对被处理的分子更加温和,不需要有机萃取,不会导致蛋白变性,且简单高效。洁特6mL规格超滤浓缩器可处理体积4mL以内的样本,离心管内包含一个内置竖直的聚醚砜(PES)膜过滤装置,聚醚砜膜具备低蛋白附着、高通量的特点,可应用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD六种不同的截留分子量中。截留分子量标识和体积刻度蚀刻在浓缩器的侧面便于识别。超滤离心管还可用于检测水中的微生物、化学物质等,并进行环境监测和控制。绍兴小型超滤离心管使用方法
超滤离心管通常被用于生物医学、制药、食品科学等领域中。绍兴小型超滤离心管使用方法
超滤是大分子脱盐、浓缩较方便的方法,重复性好,得率有保障,已经在蛋白、抗体、病毒、核酸、囊泡等样品制备中建立标准操作;在目前大热的外泌体制备中也已经成为主流方法。超滤管采用离心方式快速处理样品,是很多科研小伙伴们每天要用到的基本装备。但是,在默克生命科学团队推出超滤管中文说明书(AU0.5/4/15)之前,我们发现近90%的使用者在选择和使用过程中因为缺乏必要信息而没有获得较佳体验,更重要的是,宝贵的样本会遭受本可避免的损失!如果目的蛋白是120kDa,请问应该选择的超滤管规格是100k,50k,还是30k甚至10k?你采用的是1/2,1/3抑或1/6算法?这些没有统一的说法,是因为不同厂家的膜的截留分子量的定义不同。绍兴小型超滤离心管使用方法