PCR技术是从DNA水平对病原进行检测,将病原DNA进行大量的扩增,在通过多种途径对扩增后的产物进行检测,胶体金检测方法虽然快速、便捷的,但是该种方法是从蛋白水平对病原进行检测,故存在一定的交叉反应和动物自身抗体干扰,导致临床应用的过程中出现假阳性和假阴性的结果,巧亦捷核酸检测一体机采用的PCR技术从根本上避免了检测呈现假阳性或弱阳性的结果,极大提高了检测的灵敏性和特异性。此外,利用PCR引物的高度特异性,可以排除其他所有非致病原体的干扰,实现精确的诊断,与其他检测方法相比具有不可比拟的优势。在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。薄膜微流控PCR分析仪
巧亦捷核酸检测一体机能“稳、准、快”的检测出禽病。以犬瘟为例,CDV经由鼻、咽和上呼吸道侵入机体后首先在其附近的淋巴结和扁挑体中增殖,动物表现为ZUI初的体温升高和白细胞减少(主要是淋巴细胞减少)。传染第、一周会出现病毒血症,通过血液循环,CDV散布到全身的淋巴器1官、骨髓和上皮结构的固有膜,身体的所有分泌物中开始向外排毒。因此在病毒传染初期是无法在眼鼻分泌物中采集到病毒的,即便有少量病毒存在,胶体金试纸板也很难检测出正确的结果。这是由于胶体金试纸板上包被的抗体需要和特异抗原结合后再和预先包被的二抗结合才能显示结果,这其中需要的抗原(病毒)量较多。而PCR检测是将抗原进行扩增,只要存在抗原就可以通过特异性引物进行扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳,可见到预期大小的DNA条带出现,从而对病原体的基因组片段作出鉴定。因此,我们更推荐兽医师们使用巧亦捷核酸检测一体机。江苏快速PCR扩增巧亦捷采用的薄膜微流控技术与核酸检测技术相结合,特别适用于基因表达和病原体检测等领域。
巧亦捷核酸检测一体机的优势在于:1、全流程:以不**灵敏度和特异性为前提,将核酸提取、分子扩增、荧光检测集成在一张生物芯片上,可实现真正意义上的“样本进-结果出”。2、速度快:人工操作时间*为2分钟,从样本进到结果出只需35分钟。3、操作简单:沿用传统的检测方法学,无需复杂的实验室以及苛刻的反应环境,也无需专业的培训,随到随检,目前,巧亦捷采用“设备+试剂“的销售,与传统中心实验室相比,拥有同样的核酸检测结果的准确度,并且体积更小更易携带,检测时间短,更能满足即时检测的需求
巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。巧亦捷核算检测一体机从样本处理开始,所有检测项目可在30-60分钟完成,自动生成报告,检测效率极大提高。
目前,市面上的宠物用分子检测平台普遍存在操作复杂,单价偏高,灵敏度不佳等问题,巧亦捷依托于自主研发的薄膜微流控技术,经多年沉淀,研发出全自动快速核酸检测一体机及多种配套检测试剂,仪器自动进行核酸提取和PCR扩增,让使用者将样本加入薄膜囊袋中就可上机进行核酸检测,且支持多重联检功能,一次可检测多种病原体。多重宠物检测试剂除了可解决操作的复杂性问题,也由于采用常规的多重PCR策略,可大幅降低检测试剂的费用。PCR检测正越来越多的被动物临床医师所接受,并广泛应用于动物临床疾病诊断。苏州动物PCR
巧亦捷核酸一体机针对不同传染病的检测效果相同。不存在免疫学方法中出现的猫类检测试纸卡效果不佳的情况。薄膜微流控PCR分析仪
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。薄膜微流控PCR分析仪