在宠物医院,往往没有专业的实验环境与PCR分区,样本中病原体污染、PCR反应后产物污染都是会很影响PCR结果,导致假阳性的出现,其中PCR产物污染是导致化验室环境污染**主要的因素(PCR反应中DNA的复制是指数级的增长)。而选择不善于处理低浓度样本与复杂样本的提取方法,导致核酸提取不完全或者在**1后PCR反应中存在抑制物,污染PCR反应,则会导致漏检,产生假阴性。这些都是在核酸检测过程中需要注意的点。巧亦捷PCR反应系统采用磁珠法核酸提取纯化加荧光探针PCR方法,整机一体化,实现一机提取加扩增,减少人工操作与培训时间,轻松上手。避免污染。目前对传染性疾病更先进,准确性更高,临床价值更大的是PCR 检测方法,也是目前国外普遍采用的检测方法。江苏宠物PCR动物疫病
巧亦捷动物诊断为宠物医院、兽医师、养殖户们、宠物主及其爱宠带来高效便捷的宠物PCR核酸检测解决方案,为整个行业未来的发展,注入了新的活力。巧亦捷全自动核酸检测一体机采用PCR-TaqMan技术,提供高灵敏度与高特异性,确保检测结果的准确性,是病原体检测的金标准。帮助宠主提前了解爱宠可能潜在的疾病隐患,筛查风险,做到早发现,早诊疗。协助医生对患有疾病的猫犬、异宠等进行准确诊断和针对性诊疗。专业准确检测,助力行业发展!江苏核酸PCR扩增国外已将PCR技术广泛应用于犬瘟、犬细小、弓形虫等致病菌的检测,从根本上突破了免疫学间接检测的局限。
巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。在准确的前提下,高效显得尤为重要。
无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。即使存在于患犬或患猫体内极少量的病原微生物,巧亦捷核酸一体机采用的PCR技术也能对病原微生物进行上百万倍的复制,从而达到可以被检出的浓度,因此巧亦捷核酸一体机能对犬猫传染病进行准确、高效的诊。例如猫鼻气管炎是由猫疱疹病毒引起的一类猫上呼吸道疾病,当猫传染疱疹病毒后,会表现出一系列的上呼吸道症状,但临床尚未有成熟的快速检测方法,用巧亦捷核酸一体机则可以快速准确的得出结果。PCR技术是一种用于扩增特定DNA、片段的分子生物学技术。苏州宠物用PCR检查
巧亦捷核酸检测一体机的灵敏性和特异性上的优势,像犬猫的呼吸道、消化道和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断。江苏宠物PCR动物疫病
巧亦捷核酸检测一体机的特异性及灵敏度可达99%以上,使用的PCR荧光探针技术不但可以检测出病毒的种类,更可以检测出样品里100个/ul数量级的病毒数量,可谓特异性极强,准确度极高!若检测出有病毒,但没有发病也要引起重视,因为检测的病毒是一些对动物机体伤害极大的病毒,或者是人畜共患病,虽然现在没有发病,并不表明以后不会发病,如果任其在体内发展,等到病毒繁殖到一定的数量后,或者机体的抵抗力突然下降,也许就会发生灾难性的爆发,对动物造成极大的伤害。江苏宠物PCR动物疫病