每个生物体(包括病原微生物)都含有自己的基因,通过对某种生物的基因信息进行分析可以用来识别和区分不同的物种,甚至可以用来区分不同的个体(比如我们在犯罪大片里经常见到的通过DNA分析来抓凶手,再比如亲子鉴定)。传染病诊断也类似于刑侦,就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。那么同样可以通过分析样本中是否含有某种病原微生物的基因来实现诊断。PCR就是通过样本中的基因信息进行分析,某一种病原体的诊断试剂只会去捕捉该病原体的基因,并对其进行大量扩增。如果扩增可以发生,则结果呈阳性,也就是有这种病原微生物存在。巧亦捷核酸检测一体机的灵敏性和特异性上的优势,像犬猫的呼吸道、消化道和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断。江苏猪病诊断PCR试剂
巧亦捷核酸一体机使用情况:1:怀疑动物患有传染性疾病:PCR技术在检测传染病病原方面有很多优势,特别适用于犬猫传染性疾病的检测。如检测疾病处于潜伏期以及临床尚未有其他合适的检测方法时或一些难以进行培养的可疑病原体,都可以选择PCR检测技术。:举例:猫鼻气管炎是由猫疱疹病毒引起的一类猫上呼吸道疾病,当猫传染疱疹病毒后,会表现出一系列的上呼吸道症状,医师若想诊断该病,即可选择进行猫疱疹病毒PCR检测。2、准确判断致病病原体:对于一些临床症状较为相似的疾病,利用PCR检测的高度特异性能够准确判断致病病原体。举例:猫疱疹病毒,杯状病毒传染,猫衣原体传染引起的肺炎,在临床上均显示出相似的上呼吸道症状。由于PCR技术具有高度特异性,PCR检测可以从病原体的核酸水平进行识别,将各种病原区分开来,实现真正的精确诊断和对因诊疗。江苏动物疾病PCR技术PCR在常见传染病、**、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等领域中有相当高的实际应用价值。
大多数宠物医院运用的诊断方法为:PCR和试纸条。其区别是:试纸条原理是基于抗体抗原的免疫学方法,通过颜色或荧光标记来判读,和PCR检测是基于不同方法学的检测方式。PCR通过检测样本中有无病毒DNA(RNA)来确诊,灵敏度高、特异性强、支持检测项目多,是人医医学界公认的诊断金标准,两者区别可以理解为滴血认亲(免疫学方法)与亲子鉴定(分子诊断)的区别。目前专业的的宠物疾病机构就是使用PCR检测。巧亦捷核酸检测一体机采用国际**的薄膜微流控技术,实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,可以实现专业实验室级别的核酸检测,且检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,更适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。
巧亦捷核酸检测一体机能“稳、准、快”的检测出禽病。以犬瘟为例,CDV经由鼻、咽和上呼吸道侵入机体后首先在其附近的淋巴结和扁挑体中增殖,动物表现为ZUI初的体温升高和白细胞减少(主要是淋巴细胞减少)。传染第、一周会出现病毒血症,通过血液循环,CDV散布到全身的淋巴器1官、骨髓和上皮结构的固有膜,身体的所有分泌物中开始向外排毒。因此在病毒传染初期是无法在眼鼻分泌物中采集到病毒的,即便有少量病毒存在,胶体金试纸板也很难检测出正确的结果。这是由于胶体金试纸板上包被的抗体需要和特异抗原结合后再和预先包被的二抗结合才能显示结果,这其中需要的抗原(病毒)量较多。而PCR检测是将抗原进行扩增,只要存在抗原就可以通过特异性引物进行扩增,产物经琼脂糖凝胶电泳,可见到预期大小的DNA条带出现,从而对病原体的基因组片段作出鉴定。因此,我们更推荐兽医师们使用巧亦捷核酸检测一体机。宠物传染病检测技术方面,核酸检测方法具有极高的灵敏度和特异性,可很大程度缩短传染病检测的窗口期。
样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸,并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞,遗传物质都不是裸露在细胞外,都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界,保证PCR反应效率。将核酸释放出来后,提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉,获得纯度比较高的核酸,比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低,提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步,也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取,效率高且可确保结果更准确。巧亦捷使用的PCR扩增酶酶活是同类酶的3倍以上,检测灵敏度高。宠物用PCR分析仪
常用的qPCR方法有荧光染料法(SYBR Green I)和探针法(TaqMan)。江苏猪病诊断PCR试剂
巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。江苏猪病诊断PCR试剂