生物制剂领域常用缓冲液
生物制剂领域常用的缓冲液主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系,因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值,而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。(1)硼酸盐:硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。(2)柠檬酸盐:柠檬酸盐离子容易与钙结合,所以存在有钙离子的情况下不能使用。(3)磷酸盐:在有些实验,它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物,重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
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缓冲液的作用
缓冲液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围,例如,苯酚在碱性介质及铁**钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰,以pH在10士0.2时**为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入缓冲液,调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。在实际工作中,有些分析人员由于不大了解缓冲液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节, 以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,也就失去了缓冲的作用。
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注射级氨丁三醇缓冲液注意事项
注射级氨丁三醇是一种广泛应用于生物医药领域的缓冲盐,全称三(羟甲基)氨基甲烷,化学式C4H11NO3,白色结晶颗粒,CAS号:77-86-1,25°C下的pKa为8.06,常用于蛋白或核酸缓冲液,有效范围通常是pH7.0-9.2之间。注射级氨丁三醇被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长,注射级氨丁三醇也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH。此外Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物,注射级氨丁三醇也被用作滴定标准物。常见的注射级氨丁三醇缓冲液有Tris-HCl缓冲液、Tris-磷酸盐缓冲液以及多种衍生缓冲液,如TBS、TE等。
Tris缓冲体系广泛应用生物制剂研发与生产过程中,例如目前已上市的两款mRNA**疫苗均选用Tris/Tris-HCl作为其制剂缓冲体系,此外该缓冲体系还***用于抗体蛋白纯化等生物制剂生产环节。艾伟拓产品团队在此向您推荐一种操作简便且复现性较好的缓冲液配制方法:使用氨丁三醇(Tris)及盐酸氨丁三醇(Tris-HCl)固体粉末进行配制。使用时,可根据目标浓度及pH,计算并直接称取两种固体粉末混合,溶解定容,至于两种固体粉末的用量如何确认,您可以参考以下实验步骤以及艾伟拓实验室实测值,通过一个简单的预实验进行确认:1.分别配制目标浓度的Tris与Tris-HCl(这里以0.1mol/L为例)2.两种溶液分别取不同体积混合成相同体积(这里以100mL为例)的缓冲液,测定溶液pH.、摸索出两种溶液适宜比例后,根据计划配置的缓冲液体积,倒算两种固体粉末的用量。基于该方法,我们复现了Moderna的**mRNA疫苗中的Tris缓冲溶液,pH理论值为7~8,实测值为7.47(注:该实测值为溶液中*包含Tris/Tris-HCl,不含mRNA-LNP及其他辅料情况下的pH值)。该方法的优势是操作简便,只需称取及溶解两步,在外界温度及溶液浓度相同的情况下,复现性较好,且无需使用浓盐酸等严格受限的试剂。艾伟拓药用级氨丁三醇如何购买;
生物缓冲剂在生物化学研究中有着重要的意义,在免疫印迹、生物芯片及生物杂交等实验及体外诊断、生物医药等行业中的应用非常***。生物缓冲剂系统包含几十个品种。典型品种如注射级氨丁三醇、HEPES等。本文将介绍其中**常见的品种——注射级氨丁三醇缓冲剂的优点及使用注意事项。
注射级氨丁三醇缓冲液优点如下:1.Tris碱的碱性较强,所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液,应用范围广;2.Tris缓冲液对生物化学过程干扰很小,不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀;3.Tris在水中溶解度高,对很多酶的反应是惰性的;4.Tris缓冲能力高,在pH7.5-9.0之间有较强的缓冲能力;5.Tris缓冲剂应用***,在生物化学、分子生物学、体外诊断、化妆品、涂料等领域发挥重要作用。 艾伟拓氨丁三醇(供注射用);江西酮咯酸氨丁三醇注射
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Tris氨丁三醇缓冲剂在使用中的注意事项
上篇文章我们介绍了Tris氨丁三醇缓冲剂的优点,本篇文章我们来介绍一下Tris氨丁三醇缓冲剂在使用中的注意事项吧!使用Tris缓冲剂的注意事项:1.Tris氨丁三醇缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。2.Tris氨丁三醇缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.13.Tris氨丁三醇在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;4.Tris氨丁三醇缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;5.Tris氨丁三醇缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与Tris氨丁三醇溶液具有兼容性的电极;6.Tris氨丁三醇缓冲液不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;7.吸入,摄入,皮肤吸收Tris氨丁三醇可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;8.作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用Tris氨丁三醇,比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。 西藏酮咯酸氨丁三醇多少钱