福建液体PEI转染试剂试用装

瞬时转染方法1.接种细胞：转染前，用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，总体积如表1所示，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后，添加?体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果：在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后快7h即可检测到转入基因的表达。请自行确定检测时间。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物！用PEI转染试剂时出现沉淀是什么原因？福建液体PEI转染试剂试用装

1、细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2、制备PEI-DNA混合物：以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管，一管将质粒DNA（总量2-8μg为佳）加入240μLHBS中，混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％CO2的37℃温箱孵育。注：每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3、培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！AAV包装PEI转染试剂试用装低成本的选择PEI转染试剂能用于体内转染么？

产品简介：Transporter 5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺（PEI转染试剂）溶液，由PEI MAX配置而成，采用0.1um PES无菌过滤器，完全消除支原体污染风险。Transporter 5将DNA缩聚成带正电荷的复合物，这些复合物很容易通过内吞作用进入细胞，并且Transporter 5-DNA 复合物能很好地抵御溶酶体的降解作用，有效提高转染效率。适用于工艺开发、临床前和早期临床研究，可无缝过渡到MAXgene GMP用于商业化生产。Transporter 5转染试剂能高效地将DNA转染入HEK-293、CHO、COS、HELA、昆虫（SF9、SF21） 等真核细胞系，可作用于大到135,000个核苷酸的质粒，所以较大的质粒也可以成功地转染。 Transporter 5可节省试剂准备时间，加快项目进度。经过严格的性能检测，确保品质，在新药研发过程中是一款快速、重复性好、可用于批量产的转染试剂。产品特点：非GMP，研究级PEI转染试剂溶液；高转染效率；无缝过渡到MAXgene GMP；易放大，可预测产量；用于工艺开发，临床前和早期临床研究。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！

产品简介：Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，PEI）的产品，因其较高的转染效果，已广泛应用于工业化生产。聚乙烯亚胺是一种具有较高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳原子，即每“第三个原子都是质子化的氨基氮原子，使得聚合物网络在任何pH下都能充当有效的“质子海绵”体(protonsponge)。PEI可用作转染试剂，它可以缩聚DNA分子形成颗粒并转染真核细胞。有实验证明，分子量为25000的线性PEI即Polysciences23966（PEI25K）转染效率表现优良。产品特点：适用于生产mABs、rAbs、bsABs和病毒载体(AVV、LV、BEV)；在HEK293、CHO和Sf9细胞系中高度有效；适用于从研发到工业化生产的各个阶段；可预测，可大规模生产；两周内即可生成大量目标蛋白或病毒；高转染效率；大量已发表的文献支持。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！哪里可以买到23966-1？

PEIMAX粉末配置方法：1)将1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃烧杯中；2)放入搅拌转子，放置于磁力搅拌器上，设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡；3)等待PEIMAX40K完全溶解，通常需要5分钟左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氢氧化钠滴定至pH6.9~7.1；5)如果不小心超过7.1，则使用1N的盐酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1；6)将溶液转移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L；7)用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液；8)按需分装，4°C储存（切记不可冷冻）；注：未经配制的粉末有效期为2年。配置成液体后分装在合适的瓶子中，并且保存在4℃的转染试剂将可在6个月之内保持性能。如jin用于蛋白定性研究，分装的转染试剂可延长有效使用期至1年。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！如何辨别假的PEI转染试剂。陕西细胞转染PEI转染试剂试用装

PEI转染试剂是线性的好还是分支的好？福建液体PEI转染试剂试用装

材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI（聚乙烯亚胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI储存液（100μM）：称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS（pH7.4）：将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水，加入20ml1M的HEPES，调pH值到7.4，定容至1L，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！​福建液体PEI转染试剂试用装