山东蛋白分离离心管咨询

超滤作为一种膜分离技术，普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换，其原理是溶液在力的作用下，通过超滤膜孔径的筛滤，大分子量的颗粒被截留下来，而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜，从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的，这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效，可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上，较大样本量为15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时，将薄膜面板朝上定位，较大旋转 5000 xg，旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质，在过滤装置的底部插入一个移液管，通过左右扫动的方式将样品抽离，以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明：为达到较佳回收率，离心后应立即取出浓缩样品。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中提取蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。山东蛋白分离离心管咨询

超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白，在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子，但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子，不知道有没有谁以前做过的，有关于转速，时间给一些建议，另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理？离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失？如果要把管子重复利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是将其浸到乙醇中防于4度，还是在管子中灌入乙醇？我用过5ml的管子，当时使用的转速是4000rpm 8min，可以把5ml的样品液浓缩到约200ul，这只供参考，具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出，浸泡于装有20％乙醇的烧杯中。四度保存。绍兴100K超滤离心管厂家直销超滤离心管还可用于药代动力学和药物分析中，以确定药物代谢和药效学参数。

超滤离心管采用再生纤维素膜，具有较高的回收率（>90%）和 高浓缩倍数（80–100 倍），100%完整性检测确保性能可靠，主要应用与生物样品与蛋白浓缩、大分子组分的纯化、脱盐和缓冲液更换。再生纤维素膜具有一系列截留分子量，用户可根据目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积，选用不同体积大小和MWCO的超滤管。超滤离心管备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用。超滤离心管应用范围：*生物样品浓缩：包括抗原、抗体、酶、核酸或微生物。*对组织培养提取物或细胞裂解液中大分子组分的纯化。*对稀释或从柱洗脱液预先纯化的蛋白质进行浓缩。*脱盐和缓冲液更换。

注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。6.使用方法：1）.将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2）.向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3）.将盖好盖子的超滤管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4）.以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5）.离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6）.为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。超滤离心管通常需要在低温条件下进行操作，以避免目标分子被破坏或失活。

超滤离心管使用方法和注意事项：1、选择合适的超滤离心管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤离心管需要插在冰上预冷。3、质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法*时间处理，后果不可预测！超滤离心管还可用于检测环境样本中的微生物、重金属等有害物质。山东蛋白分离离心管咨询

超滤离心管通常由聚碳酸酯等材料制成，可承受高速旋转和高温高压。山东蛋白分离离心管咨询

超滤离心管使用的是再生纤维素膜，这种材质是蛋白吸附较低的超滤膜。但是对于一些疏水性蛋白或非极性蛋白，它们和膜的非特异吸附可能会增强，对于这种情况，可以尝试在实验前对超滤管进行封闭处理，也可以尝试换成Amicon Ultra0.5或2来进行实验，通过减小膜面积来降低非特异性吸附。超滤膜含有微量甘油。如果此成分干扰分析，可用缓冲液或Milli-Q水预清洗。如果干扰仍存在，用0.1N NaOH清洗，然后用缓冲液或Milli-Q水再次清洗后甩干。山东蛋白分离离心管咨询