杭州高离心力离心管咨询

我们面对上面客户反映的问题使用2次以上出现问题是很正常的，但是我们也不能保证客户使用5次，8次，还是更多次就一定会出现穿孔不能用，我们必须再一次强调提醒做实验的各位老师，这个超滤管必须严格按照说明书规定，一次性使用，不要重复使用，重复使用虽然有的人可以用几次，但是过滤效果已经严重影响了，效果肯定一次次的下降！你说这样过滤的样品做后续实验，那你的后续实验还可信吗？所以厂家也一再强调较好不要重复使用！另外，有的客户说自己的超滤管使用一次就碎了，这是什么原因呢？超滤管的质量问题还是离心机转速的问题呢？说到这里，我们也再一次提醒大家超滤管使用如果转速太高，离心力肯定会更大！这样不断用力磨损，很容易一次就碎了，也可能使用几次碎了！超滤离心管也可用于从血浆或尿液中提取蛋白质和核酸等大分子化合物。杭州高离心力离心管咨询

超滤是大分子脱盐、浓缩较方便的方法，重复性好，得率有保障，已经在蛋白、抗体、病毒、核酸、囊泡等样品制备中建立标准操作；在目前大热的外泌体制备中也已经成为主流方法。超滤管采用离心方式快速处理样品，是很多科研小伙伴们每天要用到的基本装备。但是，在默克生命科学团队推出超滤管中文说明书(AU0.5/4/15)之前，我们发现近90%的使用者在选择和使用过程中因为缺乏必要信息而没有获得较佳体验，更重要的是，宝贵的样本会遭受本可避免的损失！如果目的蛋白是120kDa，请问应该选择的超滤管规格是100k，50k，还是30k甚至10k？你采用的是1/2，1/3抑或1/6算法？这些没有统一的说法，是因为不同厂家的膜的截留分子量的定义不同。上海高离心力离心管采购使用超滤离心管时应注意保持其稳定性并避免操作失误导致实验失败或损坏设备。

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。

离心管主要有塑料、不锈钢制成，塑料离心管常用资料有聚丙烯（PP）.聚乙烯（PE），聚碳酸酯（PC）等。其中PP管性能较好，塑料离心管的优点是透明（或半透明），硬度小，可用穿刺法取出梯度，缺陷是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，运用寿命短；不锈钢离心管强度大，不变形，能抗冻，抗热，抗化学腐蚀，但用时要防止接触强腐蚀性的化学药品、如强酸、强碱等化学试剂。这里主要介绍塑料离心管：塑料离心管都有管盖，离心前管盖必需盖严，倒置不漏液。管盖有三种作用：①避免样品外泄，用于有放射性或强腐蚀性的样品时②避免样品挥发③支持离心管，避免离心管变形。超滤离心管在医学诊断和缓解中也具有重要作用，如血液透析、肝功能检测等领域。

离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中分离蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。上海高离心力离心管采购

超滤离心管能够去除混合物中的杂质和低分子量化合物，得到高纯度的目标化合物。杭州高离心力离心管咨询

下面是处理和重复使用超滤管的步骤。将超滤管中的水倒出来，用Milliq水轻轻冲洗几次。[如管底有可见蛋白质沉淀，可先加水，再用设备头吹气，注意不要碰触膜，吹气至沉淀悬浮，再倒出，不要冲自来水。)然后加入0.2 mNaOH溶液，室温放置20分钟，平衡超滤。在此期间定量管。离心10分钟。倒出剩余的MaOH溶液，将管芯浸入Milliq烧杯（1L或2L)中。放器数小时，然后用新水替换，放置数小时，不断稀释Na0E浓度。50ml管道和盖子用自来水冲洗，内壁用Milliq水冲洗。取出浸入水中的芯，并将其加入几乎满毫升的水中。在50毫升试管中注入毫升水。慢慢地将芯放入50毫升离心管中，排出一些水。然后盖上盖子，4度存放，直到下次使用。一般来说，根据上述步骤和注意事项，每根渠道在三到四年内不会受损。杭州高离心力离心管咨询