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病理实验外包,病理染色HE染色常见问题:Q1:HE染色比较常见的红蓝失调答:(1)偏蓝色:苏木素染色过深,分化不够;伊红试剂过期;伊红染色时间太短,分化过度。(2)偏红色:苏木素染色过浅,分化过度;组织固定不佳,细胞核不着色;脱蜡不彻底,苏木素染不上;苏木素氧化成熟不够;伊红染色过深,分化不足。Q2:HE染色后出现的大白色斑块或斑点答:脱蜡前烤片温度偏低,时间过短,蜡未完全融化;切片在脱蜡溶剂中停留时间过短;脱蜡溶剂使用太久,得更新。揭开病理实验外包神秘面纱,南京英瀚斯生物。黑龙江专门做病理实验外包公司

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病理实验外包,病理染色常见染色介绍TUNEL染色:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidylTransferase,TdT)的催化下加上荧光素(FITC)标记的dUTP(fluorescein-dUTP),从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。实验步骤使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。黑龙江专门做病理实验外包公司病理实验外包,医学实验外包,动物实验外包,就找南京英瀚斯。

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病理实验外包,病理染色组织处理的要求:恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素,在组织细胞材料准备的过程中,不仅要求保持组织细胞形态完整,更要保持组织细胞的抗原性不受损或弥漫,防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织,抗原已经丢失,即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术,也很难检出所需的抗原,反而往往由于组织的坏死或制片时的刀痕挤压,在上述区域易出现假阳性结果。组织及时取材和固定组织标本及时的取材和固定是做好免疫组化染色的关键第一步,是有效防止组织自溶坏死,抗原丢失的开始,离体组织应尽快的进行取材,比较好2h内,取材时所用的刀应锐利,要一刀下去切开组织,不可反复切拉组织,造成组织的挤压,组织块大小要适中,一般在2.5cm×2.5cm×0.2cm,切记取材时组织块宁可面积大,千万不能厚的原则,(也就是说组织块的面积可以大到3cm×5cm,但组织块的厚度千万不能超过0.2cm,否则将不利于组织的均匀固定)。固定液快速渗透到组织内部使组织蛋白能在一定时间内迅速凝固。从而完好的保存抗原和组织细胞形态。

病理实验外包,病理染色常见染色介绍油红O染色:油红O脂肪染色法是指在日常病理诊断和科研工作中为了显示组织内的脂肪常采用油红O进行染色的方法,油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。肝细胞内的脂肪滴呈红色,细胞核呈蓝色1.标本人或动物的肝组织等,甲醛—钙液固定,冰冻切片,厚10μm。2.改良的油红O染色液油红O0.5g,50%乙醇100ml。将油红O溶于乙醇内,且不断搅拌至完全溶解即可。配制好的染液置磨口瓶内保存备用。3.染色步骤①切片干燥后入50%乙醇稍洗;②油红O乙醇染液作用8min;③50%乙醇分化,自来水终止分化;④苏木素复染核,自来水返蓝,甘油明胶封片。病理实验外包所需样本如何保存。

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1.取材与固定固定剂同时具有硬化细胞组织的作用,使制片便于进行。2.洗涤与脱水洗涤是把深入组织中的固定剂洗去,防止染色中的结晶产生,驱除组织中的水分,利于透明和浸蜡。3.透明与浸蜡(透蜡)脱水后的组织中水分已被透明剂所代替,而有利于浸蜡。浸蜡的目的是使组织有一定的硬度而有利于切片和细胞组织保持一定的生活时状态。4.包埋与切片用石蜡和其他包埋剂(组织填充剂作包埋剂)包绕一定的形状以便于切片。将包埋好的组织块用切片机切成一定的厚度(厚度以um计)。5.贴片(展片、捞片)和染色将已且妥的切片在温水中展平整后用载玻片贴上,稍晾干后再烤片。染色可使细胞和组织被染上不同的颜色而产生一定的折射率,便于显微镜观察。6.切片染色后用胶类物质将其封固,便于长期保存。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测 承接各类大医学实验!专业!可靠。黑龙江专门做病理实验外包公司

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病理实验外包,冰冻切片取样实验步骤:一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料,防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内(直径约2cm)。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织,然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾,此时小盒保持原位切勿浸入液氮中,大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后,即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存,应快速以铝箔或塑料薄膜封包,立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶,将速冻组织置于其上,4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者玻片上,样品托速冻。3.组织置于样品托上,其上再添一层OCT胶,以完全覆盖为宜,速冻架(PE)上30min。黑龙江专门做病理实验外包公司

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