超滤离心管使用方法和注意事项:1、选择合适的超滤离心管,主要考虑MWCO和浓缩体积,通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤离心管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤离心管。2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤离心管需要插在冰上预冷。3、质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。离心机的加速度调至低档,减小对膜的压力。注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开离心机,否则离心机出问题时,无法*时间处理,后果不可预测!使用超滤离心管时应注意避免过度旋转造成样品混乱并影响分离效果。湖州高离心力离心管选择
离心技术主要用于各种生物样品的分离和制备,生物样品悬浮液盛放在离心管中在高速旋转下,由于巨大的离心力作用,使悬浮的微小颗粒(如细胞器、生物大分子的沉淀等) 以一定的速度沉降,从而与溶液得以分离。而离心管就是离心试验中必备的实验耗材之一。含有带电的或者疏水结构域的蛋白质更易于不可逆结合到不同表面。对超滤离心管表面做钝化预处理可降低蛋白质在膜表面的吸附性损失,大多数情况下,在浓缩稀蛋白溶液之前预处理柱子可以提高回收率,因为溶液可填满膜和表面暴露的空白蛋白吸附位点。钝化的方法是预先用较高容积的钝化溶液预浸泡柱子1小时以上,蒸馏水彻底冲洗柱子,再用蒸馏水离心一次以彻底除去可能残留在膜上的钝化溶液。注意钝化处理后别让膜干了。如果要留待以后使用,需要加无菌蒸馏水保持膜湿润。成都小型超滤离心管厂家超滤离心管通常需要在低温条件下进行操作,以避免目标分子被破坏或失活。
一般来说,我们较常用的离心管就是塑料离心管,塑料离心管的优缺点也很明显,优点是它的硬度较小,可以利用穿刺法来得到我们需要的物质。但这也正是它的缺点,因为硬度小,所以它也更容易变形,抗腐蚀性也差,所以它的寿命是比较短的。塑料离心管的还可以按照材质来选择,分别有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)这三种材质。一般大规模的实验室都是将塑料离心管做一次性使用,但一般的实验室还是会循环使用,不推荐循环使用,因为这样会造成实验结果的不准确性,但如果非要做循环使用的话小编还是建议使用pp材质的离心管,然后经过高压高温进行消毒,pp材质是上述三种材质中较好的,所以在选择的时候我们尽量选择pp材质的离心管。
超滤离心管的常见问题与解答,一:超滤离心管的膜材质是什么?超滤离心管的膜材质为特有的Ultracel再生纤维素膜,生产工艺严格,截留分子量明确而,蛋白吸附损失较小。二:如果要用超滤离心管的方法分离两种蛋白,那么这两个蛋白的大小需要相差多少?按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。不保证超滤离心管不包含RNA酶,建议用0.1%DEPC在37度浸泡2小时,以完全灭活RNA酶;残留的DEPC可以用Milli-Q超纯水洗涤除去。去污剂因其独特的性质,当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration、CMC)时,去污剂分子会聚集形成微团而改变分子构象,这有可能会影响去污剂的去除效果,具体的操作步骤请垂询我们。离心机转速会影响到超滤效果,因此需要根据实验要求调整相应的转速。
蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管,微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积,还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如,当靶蛋白的分子量为35kDa时,可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd,则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上,冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后,可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。超滤离心管还可以在生物医学领域中用于制药工艺的监测和控制。高离心力离心管厂家电话
超滤离心管可用于分离细胞培养上清中的蛋白质和小分子物质。湖州高离心力离心管选择
离心过滤器具有快速超过滤功能,能够达到较高的浓缩系数,易于从稀释液和复杂的样本组合进行浓缩液回收。其竖式设计以及可用的滤膜表面积能提供快速的样本处理和较高的样本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能进行80倍浓缩。典型的处理时间为15至60分钟,这取决于标称分子量限值(NMWL)。竖式设计将溶质极化和之后造成的滤膜结垢降至较低,过滤装置中的物理止滤点防止过滤器旋转过度使样本干燥和造成样本损失。浓缩液用移液管从过滤器的样本槽中收集,而超过滤滤出液则收集到所提供的离心管中。该装置可在摆桶或定角转子中旋转。装置未经消毒,只供—次使用。湖州高离心力离心管选择
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