广州脑脊液外泌体

常规生物学实验中，实时定量PCR技术（RT-PCR）普遍用于microRNA的检测实践中，但外泌体样品中的microRNA丰度极低，普通RT-PCR技术的灵敏度已经不能够满足。第三代微滴式数字PCR——ddPCR技术，成为外泌体microRNA检测的选择技术。微滴式数字PCR（DropletdigitalPCR），又成为“油包水PCR”，在传统的PCR扩增前对样品进行微滴化处理，即将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，逐个对每个微滴进行检测，有荧光信号的微滴判读为1，没有荧光信号的微滴判读为0，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。膜受体的识别是外泌体细胞反应的基础，它可能活跃受体并随后导致相关信号通路的活跃。广州脑脊液外泌体

研究者利用电穿孔法对外泌体进行DOX的负载，进行体内抗中流效果的研究。实验结果显示，负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。直接静脉注射DOX，其不仅水溶性低，而且容易使DOX与血液中的蛋白结合，从而被网状内皮系统识别捕获，起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌体保护DOX，可以提高DOX水溶性，避免被网状内皮系统捕捉，提高靶向性，从而降低由于用药过量和非靶向性引起的毒性，起到更好的抗中流效果。方法外泌体提取PS亲和法提取的外泌体，其蛋白特异性检测可高出10~100倍以上。

外泌体是分泌的细胞外囊泡的主要群体，是具有生物活性的脂双层囊泡，大小约为30-100nm，由不同类型的正常细胞和瘤子细胞自然产生和释放。这些囊泡在细胞间通讯中起重要作用，并影响细胞外环境和免疫系统反应。外泌体通过内体途径分泌到细胞外空间，并将各种生物活性分子（货物）转运至靶细胞。外泌体货物的组成非常多样化，包括各种免疫阻止和免疫刺激蛋白、趋化因子、细胞因子、细胞受体、脂质以及不同的核酸，如miRNA和环状RNA。外泌体可以通过多种方法给药，静脉内给药是较常用的途径。

DLS使用由于粒子的布朗运动而产生的波动散射光的强度来估计外泌体颗粒的大小分布及其zeta电位。DLS样品制备方便，只需要简单的过滤，测量速度较快，需要的样品体积较少。但由于动态光散射技术是基于光强测量，散射光的强度与粒径的六次方成正比，使得当测量多种粒径的混合悬浮液时，通常会偏向于检测较大粒径产生的散射光，比较难检测到较小颗粒。所以DLS不适合对粒径分布较宽的外泌体样本的测量，只适合尺寸较为均一的外泌体样本，并且无法测量样品中外泌体的浓度。外泌体是一种存在于细胞外的多囊泡体，通过细胞内吞泡膜向内凹陷形成。

外泌体（Exosome）介导瘤细胞的增殖过程。瘤细胞通过与自身微环境的信息交流促进瘤细胞的增殖，而外泌体（Exosome）可以充当这种信息载体。当细胞中出现基因突变时，外泌体（Exosome）会通过膜融合把这种突变信息传递至其他的正常细胞，从而导致原病基因的唤醒、抗凋亡基因的表达，使瘤细胞获得增殖特性。瘤细胞来源的外泌体（Exosome）还可以通过直接抑制免疫细胞，促进瘤细胞逃避免疫监视，为瘤细胞在体内生长创造条件。然而，虽然当前外泌体生物学仍然不成熟，但越来越多的兴趣和资金投入必将加速外泌体基础研究进展和临床转化。采用电子显微镜检测外泌体时对样品的预处理和制备要求较高，外泌体的提取方法和品质会对电镜结果造成影响。细胞上清外泌体miRNA测序

建立记录各论文实验条件的数据库也可作为规避混乱的方法之一。广州脑脊液外泌体

由于卵巢中流细胞质膜上的磷脂酰丝氨酸（phosphati[1]dylserine，PS）可以外泌体形式分泌入血，恶性卵巢ai患者血浆外泌体中的PS水平明显高于卵巢良xing病变患者和健康对照者，因此外泌体中的PS可用于协助早期卵巢恶性中流的筛查和诊断。外泌体可穿透血-脑脊液屏障的特点也为脑中流患者提供了早期诊断的重要工具。血浆微囊泡EGFRvIIImRNA已被证明可作为胶质母细胞瘤患者诊断的支持证据。2020年，DavidLyden和WilliamR.Jarnagin教授团队合作，通过探究来自不同ai种组织、血浆和其他体液的426个人类样品中细胞外囊泡和颗粒（extracellularvesicleandparticle，EVP）的蛋白质组学特征，鉴定出一批中流特异性血浆EVP蛋白（特异度和灵敏度分别为95%和90%），并可区分患者的中流类型，使基于外泌体的中流诊断和鉴别诊断向前迈进了一步。广州脑脊液外泌体

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