方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。2.制备PEI-DNA混合物：以60mm组织培养皿用420μL反应总体积为例。准备两支1.5mL离心管，一管将质粒DNA（总量2-8μg为佳）加入240μLHBS中，混匀。另一管中则用HBS将100μM的PEI储存液稀释成10μM，充分混合。然后取180μL10μMPEI溶液加入含有DNA的HBS中，充分混匀后室温静置20-30min。将这420μL的PEI-DNA混合液逐滴加入上述单层细胞的细胞培养基中，轻轻摇动平皿混匀，置于含5％～7％CO2的37℃温箱孵育。注：每次用100μM的PEI储存液前都需要先将其充分混匀，保证所取的浓度一致。3.培养6-10h后更换为37℃预热的含有血清的培养基，继续培养，16h左右可以观测到报告基因的表达。
用PEI转染试剂时，一般和DNA的比例是多少呢？化学合成PEI转染试剂使用注意事项
化学转染方法是生物医学研究中常用的转染方法，主要包括两类：阳离子脂质体和阳离子聚合物。其基本原理是利用阳离子的化学分子与带有负电荷的核酸通过正负电荷作用形成稳定的复合物。一方面使复合体整体带上正电荷（多数细胞膜表面带有弱的负电荷，通过电荷作用吸引复合体到细胞膜表面）；另一方面对线性的核酸进行浓缩，使其体积变小更易穿透细胞膜。阳离子聚合物类转染试剂可以说是贫穷实验室的福音了。早在2012年就有研究小组在大名鼎鼎的Nature Protocol上发表了PEI作为转染试剂的详细方法，到现在被越来越多的实验室采用。更多关于Polysciences PEI相关产品内容欢迎咨询上海曼博生物医药科技有限公司！低毒性PEI转染试剂品牌用PEI转染试剂时出现沉淀是什么原因？
瞬时转染方法1.接种细胞：转染前，用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，总体积如表1所示，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL离心管。
对大多数细胞来而言，每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX转染试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1.5~4μL体积线性PEIMAX转染试剂进行优化。.PEIMAX(MW40,000)为Polysciences公司生产的化合物产品，每批产品出厂前都经过严格的检测,保证每批产品都100%合格、稳定且品质高,但由于作为转染试剂使用过程中有很多实验室因素(配置方法，PH,水纯度,称量的准度,dnaRNA纯度,细胞状态，细胞品系…)造成溶解出现问题或者转染效率出现差异,所以厂家只受理该产品纯度，分子量及重量缺失破损等相关投诉，针对极个别客户溶解问题和转染效率问题我们能友善解决。PEI转染试剂的残留检测方法怎么开发？
特别提醒：
1.对于某些类型的细胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS细胞，在转染前两天铺板可显著提高转入基因的表达水平。如果选择转染前两天铺板，可适当降低铺板密度，以确保转染时细胞的汇合度仍为70~80%。2.对于接触抑制敏感的细胞，可适当降低铺板密度。3.即使在有蛋白（如10%的血清）存在的情况下，DNA-PEI复合物仍能转染细胞，但是DNA-PEI复合物必须在无蛋白存在的条件下形成。我们推荐使用Opti-MEMITM培养基以达到*转染效率。其他的无蛋白培养基则需测试与线性PEI转染试剂的兼容性。4.对大多数细胞来而言，每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM试剂都能获得较高转染效率。使用者也可尝试每1μgDNA使用1~4μL体积线性PEI转染试剂进行优化。 用PEI转染时，一般和DNA的比例是多少呢？无动物源成分PEI转染试剂残留检测方法
有哪些好的PEI转染试剂品牌？化学合成PEI转染试剂使用注意事项
瞬时转染方法1.接种细胞：转染前，用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，总体积如表1所示，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL离心管。更多关于Polysciences PEI，欢迎咨询上海曼博生物！化学合成PEI转染试剂使用注意事项
上海曼博生物医药科技有限公司主营品牌有PL Bioscienc,Quan-Lab,Polysciences,Sirion Biote,CN-Bio,Dharmacon,Horizon,Pfenex,Visual Prote，发展规模团队不断壮大，该公司贸易型的公司。曼博生物是一家有限责任公司企业，一直“以人为本，服务于社会”的经营理念;“诚守信誉，持续发展”的质量方针。公司拥有专业的技术团队，具有血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机等多项业务。曼博生物顺应时代发展和市场需求，通过**技术，力图保证高规格高质量的血小板裂解液，WB自动孵育系统，微流控器官芯片，蓝牙无线标签机。
产品特点：PEIMAX40K是线性聚乙烯亚胺盐酸盐形式（LinearPolyethylenimine...
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【详情】上海曼博生物医药科技有限公司始终致力于为客户提供一站式生物医药科技服务，以创新和为价值理念，通过自身...
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【详情】产品简介Transporter5转染试剂是一种非GMP等级的即用型线性聚乙烯亚胺（PEI转染试剂）溶...
【详情】注意事项质粒质量：请务必使用高质量转染级无内质粒（推荐使用QIAGEN或者MN公司去内质粒提取试剂盒...
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【详情】产品简介：Polysciences转染试剂系列是基于聚乙烯亚胺（Polyethylenimine，P...
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