(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)hepes缓冲液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用户0mmkBeAVT稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐!海南采购HEPES价格
外源基因导入真核细胞的方法有很多种,如磷酸钙转染法、DEAE-葡聚糖转染法、脂质体法、电穿孔法、显微注射法等。2×HEPES缓冲盐溶液主要用于磷酸钙转染,其主要成分为HEPES,HEPES是一种非离子两性缓冲剂,能有效控制pH在范围,尤其在pH具有较好的缓冲能力,终浓度一般为mmol/L,培养液内含mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。Leagene HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS)是一种常用的细胞转染溶液,主要由HEPES、氯化钠、磷酸盐等组成,其**适pH值为,经过滤除菌处理。影响磷酸钙转染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA 在细胞上停留的时间、休克时间。Leagene 2xHeBS要求DNA浓度在为宜,Hela、BALB等细胞沉淀放置,CHO、DUKX、BⅡ等细胞可以通过甘油、DMSO进行热休克处理以提高转染效率。广西7365-45-9HEPES批发GMP条件下生产AVT注射级HEPES!
使用注射级氨丁三醇缓冲剂的注意事项:1.Tris缓冲液的pH值受温度影响大,△pKa/℃=-0.031,例如:4℃时缓冲液的pH=8.4,则37℃时的pH=7.4,所以一定要在使用温度下进行配制,室温下配制的Tris-HCl缓冲液不能用于0℃~4℃。2.Tris缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大,缓冲液稀释十倍,pH值的变化大于0.13.Tris在一定程度上与各种分子反应,包括RNA酶抑制剂,醛,酶,DNA以及常见金属如Cr3+,Fe3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系统中会起抑制作用,在配制过程中需考虑与其他组分之间的相互作用;4.Tris缓冲液易吸收空气中的CO2,配制的缓冲液要注意盖严密封;5.Tris缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用,需使用与注射级氨丁三醇溶液具有兼容性的电极;6.Tris缓冲液不适用于二喹啉甲酸(BCA)测定;7.吸入,摄入,皮肤吸收注射级氨丁三醇可造成伤害,操作时需戴好手套和护目镜;8.作为蛋白缓冲液时,若后续工作需要质谱,则不适宜用注射级氨丁三醇,比较好换成其他质谱仪可耐受的缓冲液。
制剂研发、医学检测,药物生产与保存以及分析实验等,几乎都需要缓冲溶液的参与才能正常进行,同时所需要的缓冲液又各有不同。因此对于制剂研发人员来说,只有掌握缓冲溶液的相关知识及用途,才能正确地根据实际需要选择一定浓度和pH值的缓冲溶液来使用。在选择缓冲溶液时,既要考虑它的毒性、稳定性、有效的缓冲范围,还要考虑所选缓冲溶液是否与主体物质反应、对主体物质的干扰性以及是否与主药发生配伍禁忌等。经过上述分析,在四种常见缓冲体系中,Tris-HCl缓冲溶液和HEPES缓冲液是较为理想的生物缓冲剂,在抗体药物,mRNA疫苗,脂质体药物等生物制剂中均有所应用,但都有一定的限制,制剂开发时需进行充分考量及比对。国内艾伟拓稳定供货HEPES!
在细胞培养过程中,经常少不了HEPES缓冲液。那么,HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势,在开放式的培养条件中,若加入HEPES,可防止培养基内pH氧化升高,从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。GMP条件下生产艾伟拓稳定供货注射级HEPES!湖南辅料HEPES现货供应
国内艾伟拓稳定供货注射级HEPES。海南采购HEPES价格
储存方法:HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项:HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻,否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine,CAS是5704-04-1,是一种两性离子缓冲液,名字由Tris和glycine衍生而来,结构类似于Tris,但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性,也是“Good”缓冲液之一,**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8,pKa=8.1(25℃),常用做电泳缓冲液,以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性,非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中,比较10种常见的缓冲液,Tricine(25mM)表现出比较好的检测效果。另外,在自由基诱导的膜损伤实验中,Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者:泰安格林化工链接:海南采购HEPES价格
【关于我们】艾伟拓(上海)医药科技有限公司AVT.是国内一家专营磷脂类药用辅料的科技公司,旗下产品覆盖天然磷脂、合成磷脂、功能化磷脂等细分领域,并提供诸如油酸、油酸钠、胆固醇等相关辅料产品。A.V.T.专注脂质体、脂肪乳、微纳米靶向制剂等递药体系,是国内药企、高校、研究所等单位主要磷脂供应商。
【合作品牌】我们的合作品牌包括日本丘比(kewpie)株式会社、日本精化(NFC)株式会社、瑞士CordenPharma等厂商,是相应品牌在中国的代理商,全权负责中国境内的产品销售及技术支持与售后服务。