支原体去除的原理通常涉及以下几个方面: 1. 抗*素作用:使用特定的抗*素制剂来抑制支原体的生长和繁殖。例如,含有喹诺酮类、四环素衍生物类和大环内酯类抗*素的混合制剂,这些抗*素能够抑制支原体的DNA和蛋白合成。 2. 破坏细胞膜:支原体去除剂中的抑菌肽(AMPs)成分通过破坏支原体细胞膜的完整性,导致支原体细胞死亡。...
查看详细 >>细胞培养过程中如果发现支原体污染,可以采取以下一些方法尝试去除污染: 1. 抗*素治*:使用针对支原体有效的抗*素,如四环素类、大环内酯类、氟喹诺酮类等。根据搜索结果,可以加入高浓度抗*素进行冲击治*,例如庆大霉素 200ug/ml,四环素10ug/ml,卡那霉素50ug/ml,并维持24-48小时后再换入常规培养...
查看详细 >>根据提供的信息,支原体去除试剂是一种混合制剂,通过抑制DNA和支原体生长所必须的相关蛋白合成来取得良好的支原体清*效果,同时对细胞无伤害。它被设计为对细胞毒性小,不影响后续的细胞实验,包括细胞活力检测和细胞转染等。这表明使用支原体去除试剂去除支原体后,理论上不应该对细胞的转染效率产生负面影响。 此外,支原体污染本身会对细胞的转...
查看详细 >>免疫沉淀IP实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ,它能够直接高效、快速结合抗体,而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构,这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触,具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同,磁珠是固...
查看详细 >>qPCR法,即定量聚合酶链式反应(Quantitative Polymerase Chain Reaction)法,是一种高度灵敏和特异的分子生物学技术,用于检测和定量DNA序列。在支原体检测中,qPCR法的原理主要包括以下几个步骤: 1. DNA提取:首先从待测样本中提取DNA,这可能包括细胞培养上清液或组织样本中的支原体DN...
查看详细 >>RNA免疫沉淀技术(RIP)是一种研究RNA与蛋白质相互作用的重要方法,其应用领域主要包括: 1. 转录后调控研究:RIP技术可以帮助研究者了解RNA在转录后水平如何被调控。 2. 表观遗传调控:RIP技术用于研究RNA结合蛋白(RBPs)在表观遗传调控中的作用。 3. 非编码RNA功能研究:RIP技术可以用来研究长...
查看详细 >>ChIP(染色质免疫沉淀)实验是一种强大的技术,用于研究蛋白质与DNA之间的相互作用,尤其是在转录调控、DNA修复、复制以及表观遗传学领域。然而,像所有实验技术一样,ChIP实验也有其优点和缺点。 ChIP实验的优点: 1. 体内反应的反映:ChIP提供了一种在体内研究蛋白质与DNA相互作用的方法,能够真实、完整地反映结合...
查看详细 >>免疫沉淀技术(Immunoprecipitation, IP)的实验方法通常包括以下步骤: 1. 样本准备 2. 蛋白质浓度测定:使用BCA、Bradford或Lowry等方法测定裂解液中蛋白质的浓度。 3. 抗体预处理:如果使用预固定的抗体,需先将抗体固定在固相支持物上,如琼脂糖珠或磁性微珠。 4. 免疫沉淀...
查看详细 >>免疫沉淀实验中磁珠还是琼脂糖珠的选择取决于客户实验情况。 琼脂糖珠海绵状的结构 (直径 50-150 μm) 可以结合抗体 (继而结合靶蛋白) ,它能够直接高效、快速结合抗体,而不需借助特殊的专业设备。琼脂糖珠呈多孔结构,这使得它们拥有更大的表面积可与蛋白质相互接触,具有更高的结合载量。 与琼脂糖珠不同,磁珠是固体,...
查看详细 >>免疫沉淀(immunoprecipitation)是指利用抗体可与抗原特异性结合的特性,将抗原(常为靶蛋白)从混合体系沉淀下来,初步分离靶蛋白的一种方法。免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理非常简单,如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相...
查看详细 >>Co-IP的优势: 1. 生理相关性:Co-IP可以在接近生理条件的条件下捕获蛋白质相互作用。 2. 特异性:使用特异性抗体可以提高实验的特异性。 3. 广泛应用:Co-IP技术适用于多种样本类型,包括细胞培养、组织样本等。 Co-IP的局限性: 1. 抗体依赖性:需要高质量的特异性抗体,否则可能得到假阳...
查看详细 >>支原体污染后的细胞是否应该直接丢弃还是尝试重新培养,这取决于多种因素,包括细胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法来清*支原体。以下是一些处理支原体污染的常见方法: 1. 直接丢弃:对于非重要的细胞,如果培养中的细胞、WCB的细胞等,可以采取直接将培养物与用过的培养基灭活后丢弃的方式。 2. 使用支原体清除剂:支...
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