细胞库支原体检测的必要性主要体现在以下几个方面： 1. 确保细胞库的质量与安全性：细胞库的建立需要为生物制品的生产提供检定合格、质量相同、能持续稳定传代的细胞。支原体检测是确保细胞库中细胞质量的重要环节。 2. 符合监管要求：支原体检测是生物制品安全性监管的一部分，全球范围内的药典、法规和指导文件中都有支原体检测的相关说明...

  支原体去除试剂在清*支原体的过程中可能会对细胞的生长状态产生一定的影响。支原体去除试剂是一种非抗*素类试剂，它通过与支原体膜特异性结合，改变支原体膜的通透性，从而导致支原体破裂死亡。尽管该产品在作用期间可能会对细胞的活力和形态有一定的影响，但由于它不能穿过真核细胞的细胞膜，因此不会改变细胞的任何特性。支原体被清*后，细胞在后续的传代过...

  对于同一个样品，如果一步法恒温试剂盒检测结果为阳性，而PCR检测为阴性，可能的原因包括： 1. 检测的支原体种类不同：一步法恒温试剂盒可能检测的支原体种类更多，例如可以涵盖27种支原体，而PCR检测可能只针对常见的12种支原体进行检测。因此，如果样品中污染的支原体种类不在PCR检测的范围内，就可能出现一步法检测为阳性而PCR检测...

  检测新鲜培养基是否有支原体污染，可以采用以下五种方案： 1. 培养法：这是一种传统且可靠的方法，通过将培养基接种到适宜支原体生长的微生物培养基或琼脂平板上，观察是否有支原体生长。这种方法较为耗时，但成本较低。 2. 荧光染色法：使用特定的荧光染料（如Hoechst 33258）对细胞进行染色，然后在荧光显微镜下观察。如果存...

  例如，可以用于研究蛋白质的相互作用，如蛋白质与DNA、RNA或其他蛋白质的结合；可以用于研究蛋白质的定位，如蛋白质在细胞中的定位或亚细胞定位；还可以用于研究蛋白质的功能，如酶活性、信号转导等。总之，蛋白免疫沉淀是一种重要的实验技术，可用于研究蛋白质的相互作用、定位和功能。通过选择合适的抗体、细胞或组织的裂解、免疫沉淀、洗涤和蛋白质的分离和...

  接下来，通过添加沉淀剂（如蛋白A/G琼脂糖或蛋白A/G磁珠），将免疫复合物沉淀下来。沉淀后，通过洗涤步骤去除非特异性结合的蛋白质和杂质。，通过热变性或酸性条件将目标蛋白质从抗体上解离，得到纯化的目标蛋白质。蛋白免疫沉淀的步骤包括样品制备、抗体结合、沉淀、洗涤和洗脱。首先，需要从细胞或组织中提取目标蛋白质。这可以通过细胞裂解、离心和溶解等步...

  支原体污染后的细胞是否应该直接丢弃还是尝试重新培养，这取决于多种因素，包括细胞的重要性、污染的程度、以及是否有有效的方法来清*支原体。以下是一些处理支原体污染的常见方法： 1. 直接丢弃：对于非重要的细胞，如果培养中的细胞、WCB的细胞等，可以采取直接将培养物与用过的培养基灭活后丢弃的方式。 2. 使用支原体清除剂：支...

  支原体去除后对细胞检测的影响主要取决于去除方法和去除后的处理。以下是一些可能的影响： 1. 去除方法的影响：不同的支原体去除方法可能对细胞检测产生不同的影响。例如，一些去除方法可能会对细胞的代谢和增殖产生暂时性的影响，这可能会影响某些类型的细胞检测。 2. 去除后的处理：去除支原体后，细胞可能需要一段时间来恢复其正常的生理...

  目前有 210 +种不同种类的支原体分布于人类、动物、昆虫和植物中，其中 20 +种在细胞培养中被发现为污染物。支原体在实验室中的传播来源多种多样，主要来源包括实验室人员、胎牛血清（FBS）或新生牛血清（NBS）、以及由猪来源的胰蛋白酶溶液。此外，来自其他实验室或商业供应商的细胞培养物、培养基、污染的试剂；非无菌供应品、培养基和溶液；实验...

  支原体污染一旦发生，不仅对细胞培养造成严重影响，甚至可能导致实验结果失真。而且支原体污染在细胞培养实验中相当常见。因此，预防措施是确保细胞培养环境和实验结果可靠性的重要手段。 01/ 良好的无菌技术及实验操作，保证操作不会引入新的污染 02/ 保持实验空间的清洁 03/ 确保从可靠的来源获取细胞，减少不同细胞之...

  对于同一个样品，如果PCR检测结果为阳性而一步法恒温检测试剂盒结果为阴性，可能的原因包括： 1. 灵敏度差异：PCR方法通常具有较高的灵敏度，可以检测到单个拷贝的支原体DNA。相比之下，一步法恒温检测试剂盒可能需要更高的支原体拷贝数才能检测出阳性结果，例如需要10^3个拷贝。如果样品中的支原体数量低于一步法试剂盒的检测...

  细胞培养中，支原体检测的重要性体现在以下几个方面： 1. 高污染发生率：支原体对培养细胞的污染发生率非常高，据估计平均发生率在60%左右。 3. 隐匿性强：支原体污染具有很高的隐匿性，早期不容易被发现，除非使用特异性和灵敏度都非常高的专业检测试剂盒。 3. 影响实验结果：支原体污染会改变细胞的生理性质，影响实验...